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  • -分类名称
    一级分类:体液和排泄物检查;二级分类:脑脊液检查
  • -英文名称
    endothelin in cerebrospinal fluid
  • -别名
    脑脊液内皮缩血管肽
  • -概述
    概述:
    ET是一类活性多肽,广泛分布于各种组织中如血管平滑肌、肾脏、心脏、脊髓灰质、肝脾等。现已证明:内皮素-1仅由内皮细胞产生,内皮素-2可能产生于肾脏,内皮素-3可能主要产生于神经组织。内皮素的生物合成是由细胞内前内皮素原(203个氨基酸)经内肽酶水解生成的内皮素原(38~39个氨基酸组成),再经内皮素转化酶作用形成内皮素(21个氨基酸残基组成)。体循环中的内皮素不易透过血脑屏障,实验表明内皮素主要分布在下丘脑、丘脑、侧脑室、苍白球、尾状核、脑干包括脑桥等处。生理功能是目前所知的最强的缩血管物质,对心肌有正性肌力作用,在脑和脊髓中不仅作为主递质,也作为辅递质,中枢神经产生的ET主要作为神经调节肽,以旁分泌和自分泌的形式参与血压、行为调节和神经信息的传递等。
  • +原理
    原理:
    内皮素(endothelin,ET)是由血管内皮细胞释放的21个氨基酸残基所组成活性多肽。它是迄今所知收缩血管作用最强的物质。由于在血浆中浓度很低,样品要经柱层析纯化,125I-ET要求必须高纯度和高比放射活性,以此建立超灵敏的放射免疫方法。样品中微量的ET首先和限量抗体结合,然后再加入125I标记ET和抗体剩余部分结合,即非平衡法来完成样品中极微量ET的测定。
  • +试剂
    试剂:
    (1)缓冲液:取0.1mol/L pH7.4PB1000ml,加NaCl 2.5g,BSA 1g,NaN30.5g,Triton X-100 1ml。
    (2)标准ET-1液:取每安瓿含有10ngET-1标准品,用缓冲液溶解,稀释成100μl中含有0.25,1.0,10,100,1000pg。临用前配制。
    (3)125I-ET-1:取标记物用缓冲液稀释至100μl中约6000~8000cpm。
    (4)抗血清:用缓冲液稀释至100μl结合125I-ET-I 100μl的30%~40%。临用前配制。
    (5)PR分离剂:取140g/L PEG20ml,加入蒸馏水70ml,羊抗兔IgG血清3ml,正常兔血清0.5ml,纤维素粉0.5g,加蒸馏水至100ml,放4℃12h后应用。
  • +操作方法
    操作方法:
    使用放射免疫操作法。
  • +正常值
    正常值:
    83.9±13.8ng/L。
  • +临床意义
    临床意义:
    CSF中ET含量升高见于脑外伤、蛛网膜下腔出血(特别是伴脑血管痉挛者比未痉挛者更显著)。
  • +附注
    附注:
    创伤性休克(脑外伤等)CSF中ET水平升2~6倍。休克过程中组织缺血以及儿茶酚胺的大量释放,都可促进ET的合成和稀放。血浆和CSF ET水平测定可以作为休克的监测指标。
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