试剂:
(1)巴比妥-巴比妥钠缓冲液(pH8.6±0.1,离子强度0.06):称取巴比妥2.21g,巴比妥钠12.36g于500ml蒸馏水中,加热溶解,待冷至室温后,再用蒸馏水补足至1L。
(2)染色液
①丽春红S染色液:称取丽春红S0.4g及三氯醋酸6g,用蒸馏水溶解,并稀释至100ml。
②氨基黑10B染色液:称取氨基黑1080.1g,溶于无水乙醇20ml中,加冰醋酸5ml,甘油0.5ml,使溶解。另取磺基水杨酸2.5g,溶于74.5ml蒸馏水中,再将二液混合摇匀。
(3)漂洗液
①5%(V/V)醋酸溶液:适用于丽春红染色的漂洗。
②甲醇45ml、冰醋酸5ml和蒸馏水50ml,混匀。适用于氨基黑10B染色的漂洗。
(4)透明液:称取柠檬酸(C6H6Na3O7·2H2O)21g和N-甲基-2-吡咯烷酮150g,加蒸馏水溶解,并稀释至500ml。亦可选用十氢萘或液体石蜡透明。
(5)0.4mol/L氢氧化钠溶液。