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中性粒细胞杀菌试验
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分类名称
一级分类:免疫学检查;二级分类:细胞免疫测定
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英文名称
neutrophil killing bacterial test
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别名
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概述
概述:
中性粒细胞吞噬细菌时,通过中性粒细胞内多种因素(如过氧化物酶、补体等)共同作用将菌杀死。如果缺乏某一种酶(过氧化物酶),虽然吞噬功能正常,但不能将吞噬的细菌杀死,甚至还可将细菌携带随其游走,使感染扩散。
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原理
原理:
将分离的白细胞与定量细菌混合培养后,用培养法检测胞内外细菌的存活率,推知白细胞杀菌和胞内消化细菌的能力。
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试剂
试剂:
(1)1.0g/L明胶的Tc-199培养液。
(2)金黄色葡萄球菌悬液(5×10
7
/ml)。
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操作方法
操作方法:
(1)按自然沉降法分离受检者白细胞,用1.0g/L明胶的Tc199培养液配成5×10
6
/ml细胞悬液。
(2)取受检白细胞悬液0.5ml,加金黄色葡萄球菌悬液0.1ml,健康人新鲜血清(作为调理素)0.4ml。
(3)每一标本一式两份。一份移置37℃培养2h后,离心(1500r/min)10min;另一份不经过培养直接离心。
(4)各取上清液用PBS倍比稀释,取标本1ml,加9ml普通琼脂培养基,倾注平板,37℃培养24h,计菌落数。
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正常值
正常值:
杀菌率32.72±7.83。
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临床意义
临床意义:
杀菌活力降低,说明机体对感染抵抗力降低,易遭受细菌的感染。多见于先天性慢性肉芽肿病及中性粒细胞功能异常症、糖尿病、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、慢性粒细胞性白血病、髓性及淋巴性增殖病、骨髓炎、某些病毒感染、类风湿性关节炎、红斑性狼疮、长期应用类固醇、秋水仙碱及长春新碱、酒精中毒及吸烟者。
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附注
附注:
(1)如需做胞内杀菌力测定,则分别取上述未经培养及2h培养的离心沉淀细胞,加无菌蒸馏水10ml,使白细胞在低渗下彻底破坏,将溶解液用PBS倍比稀释,取样用倾注培养法检测生长的菌落数,推知白细胞内杀菌的能力。
(2)因为本试验需要有细胞外因子(抗体及补体)和细胞内因子,故本试验适用于检查吞噬细胞功能障碍或检查是否缺乏补体与特异性抗体。
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