操作方法:
(1)将受检血清置56℃水浴灭活30min，并用生理盐水稀释25倍。
(2)取稀释受检血清在10×75mm试管中按实际需要作系列倍比稀释，每管0.1ml，最后一管仅加生理盐水0.1ml作为抗原对照管。
(3)分别加入各群或各型钩端螺旋体悬液0.1ml，此时血清最终稀释度为1∶50、1∶100混合后，放置37℃2～3h。
(4)将各管重悬后取1滴悬液，分别放在载玻片上，覆以盖玻片，于高倍暗视野显微镜下观察其凝集溶解现象。
(5)结果判断：
(＋＋＋＋)几乎全部螺旋体发生溶解、破坏或变形，仅间有极少数正常螺旋体。
(＋＋＋)大部分螺旋体凝集成蜘蛛网状或团状，间或有少数游离。
(＋＋)在半数视野中可见有凝集团存在，正常游离的螺旋体数较对照管少。
(＋)仅有少数凝集，检查10个视野，仅1～2个视野中见有凝集团存在。
(－)全部螺旋体呈正常分散存在。
