原理:

在含有抗AT-Ⅲ抗血清(抗体)的琼脂糖凝胶板孔中，加入受检血浆或血清(抗原)，进行电泳，抗原和抗体会形成特异地火箭样免疫沉淀峰。沉淀峰的高度与样品中AT-Ⅲ的抗原量成正比关系。

操作方法:

(1)将溶解后的兔抗人AT-Ⅲ血清(试剂A)按瓶签标示稀释倍数的一半，用电泳缓冲液稀释备用。另用水配成20g/L浓度的琼脂糖溶液。将上述两种溶液在56℃等量混匀，倾入夹有80mm×80mm×1.5mm“U”形模框的两块玻板中，待凝固后，于板之一侧打一排加样孔，孔径2mm，孔距3mm。

(2)将溶解后的标准血浆(试剂B)用水作1∶2、1∶4、1∶8、1∶16的稀释，样品也用水作1∶5稀释，然后用微量加样器分别定量加入加样孔，每孔5μl，于15V/cm电势梯度下，电泳6h(加样孔应置于负极侧)。

(3)电泳完毕，将凝胶板置4.4mmol/L磷钼酸溶液中，固定15min，量取各火箭峰，自加样中心至峰尖的高度(mm)。以不同稀释度标准血浆的峰高(X)对相应的AT-Ⅲ抗原含量(Y)在正坐标纸上制作标准曲线。再将样品的峰高在标准曲线上直接读出AT-Ⅲ抗原含量；亦可作直线回归运算，得回归公式Y＝bx＋a，将样品的峰高代入式中x，即得出ATⅡ∶Ag的含量Y。

临床意义:

(1)AT-Ⅲ缺乏或减少：见于：①先天性AT-Ⅲ缺陷，按AT-Ⅲ∶Ag和AT-Ⅲ∶a测定结果分为交叉反应物质阴性型(即AT-Ⅲ∶Ag与AT-Ⅲ∶a均减低)及交叉反应物质阳性型(即AT-Ⅲ∶Ag正常而AT-Ⅲ∶a减低)，②获得性AT-Ⅲ缺乏，见于严重肝脏疾病、DIC、外科手术后、血栓前状态和血栓性疾病等(如肾小球疾病、恶性肿瘤、心脑血管病)。

(2)AT-Ⅲ增高：见于血友病，口服抗凝剂和应用黄体酮等药物。再生障碍性贫血，心瓣膜病，尿毒症，肾移植。