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  • -分类名称
    一级分类:体液和排泄物检查;二级分类:唾液与泪液检查
  • -英文名称
    muramidase in tear fluid
  • -别名
  • -概述
    概述:
    在人体各种分泌液中,泪液溶菌酶含量最高,为血清中含量的1000倍以上。主要由泪腺组织所产生,在机体局部的非特异性免疫中起重要作用。
    测定溶菌酶的方法有免疫学法和非免疫学法。非免疫学法即利用溶性微球菌(M.Lysodeikticus)作为底物,用平皿法或光电比浊法测定。这类方法操作简便,其检测灵敏度能满足泪液标本的要求。目前常用透射比浊法测定。
  • +原理
    原理:
    根据朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律当光线通过抗原抗体反应系统时,由于溶液中存在抗原抗体复合物,光线被吸收。吸收的量和复合物的量成正比(图1)。
    E:吸光度变化率;
    Io:入射光;
    I:透光度;
    C:溶液的浓度;
    K:cd或常数;
    c:分子吸光系数;
    d:光路长。
    测定方法有沉淀反应免疫比浊法和乳胶颗粒被动凝集免疫比浊法。
    (1)沉淀反应免疫比浊法:当抗体过剩时,抗原、抗体最适比值浓度范围大致呈直线。应用紫外波长(340nm)可测定抗原抗体复合物浊度。大多数光电比色计,分光光度计及自动生化分析仪均可用于比浊。
    (2)乳胶颗粒被动凝集免疫比浊法:将抗体致敏在乳胶颗粒上,加上抗原时,致敏的乳胶颗粒与抗原相结合,形成大小不等的凝集块。凝集颗粒小时,光可通过;凝集颗粒大时,光散乱,透过光减少。利用此原理,可采用两种方式比浊。
    ①白色光乳胶颗粒比浊法:乳胶颗粒直径在0.1~0.8μm范围时,粒径大,吸光度增加,用500nm左右波长;0.1μm粒径可用585nm波长进行测定。
    ②近红外光乳胶颗粒比浊法:与白色光比浊原理相同,粒径0.2μm乳胶颗粒,可用940nm近红外光测定。
  • +试剂
    试剂:
    (1)参考标准和抗血清:可选用国内标准化产品,根据其效价进行不同浓度稀释。
    (2)稀释液:聚乙二醇(PEG,MW6000)40g,NaF 20g,NaN30.5g,NaCl 9g,加蒸馏水溶解并稀释至1000ml,0.45μm滤膜过滤,保存备用。
    (3)生理盐水:用0.45μm滤膜过滤。
  • +操作方法
    操作方法:
    使用免疫透射比浊操作法。
  • +正常值
    正常值:
    1.4±0.5g/L。
  • +临床意义
    临床意义:
    泪液溶菌酶浓度降低见于干性角结膜炎及疱疹性角膜炎。
  • +附注
    附注:
    (1)透射比浊时,应采用颗粒吸收最强烈的波长,否则将影响曲线斜率。
    (2)应保证检测仪器的良好性能,测定仪器光学系统调换零件时,应重新绘制比浊法的曲线,否则容易引起误差。
    (3)比浊法易受外界条件的影响,因此,试验条件、试剂浓度、用量等要求一致,混悬液中颗粒大小要均匀,重现性好,否则将影响结果。
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