操作方法:
(1)方法1:
①溶解冻干的试剂或将冻存的试剂彻底复融,操作温度不得高于25℃,用前轻轻混匀。
②将试管编号,均做双管。
③加入试剂:
A.总计数管:放置一旁至步骤④。
B.非特异性结合管(NSB):100μl 0标准品。
C.0标准品:100μl 0标准品+200μl兔抗胰岛素C-肽血清。
D.胰岛素C-肽标准品(A-E):100μl标准品+200μl兔抗胰岛素C-肽血清。
E.质控和待测标本:100μl血清或尿标本+200μl兔抗胰岛素C-肽血清。
④每管加200μl125I胰岛素C-肽。
⑤轻轻混匀,试管中不能产生气泡,2~8℃孵育16~24h。
⑥沉淀剂用前充分混匀,除总计数管外每管加500μl沉淀剂。
⑦轻轻混匀,试管中不得有气泡,20~25℃孵育15~20min。
⑧在20~25℃以760×g离心20min。
⑨倾出管内上清液体(总计数管除外),用吸水纸吸干。
⑩用γ计数器计数沉淀和总计数管。
(2)方法2:
①溶解冻干的试剂或将冻存的试剂彻底复融。操作温度不得高于25℃,用前轻轻混匀。
②将试管编号,均做双管。
③加入试剂。
A.总计数管:放置一旁至步骤⑤。
B.非特异性结合管(NSB):100μl 0标准品。
C.0标准品:100μl 0标准品+200μl兔抗胰岛素C-肽血清。
D.胰岛素C-肽标准品(A-E):100μl标准品+200μl兔抗胰岛素C-肽血清。
E.质控和待测标本:100μl血清或尿液标本+200μl兔抗胰岛素C-肽血清。
④2~8℃孵育16~24h。
⑤每管加200μl125I胰岛素C-肽。
⑥轻轻混匀,不得有气泡,2~8℃孵育16~24h。
⑦沉淀剂用前充分混匀,除总计数管外,每管加500ml。
⑧轻轻混匀,不得有气泡,20~25℃孵育15~25min。
⑨在20~25℃以760×g离心20min。
⑩倾出管内上清液(总计数管除外),用吸水纸吸干。
⑪用γ计数器计数沉淀和总计数管。