操作方法:
(1)尿样收集：以5ml浓盐酸作为防腐剂，收集24h尿样本，充分混合后取2%尿液进行测定。
(2)水解：将尿样置于100ml三角瓶中，以3mol/L硫酸调pH至1.5～2.0(用精密pH试纸)。瓶口覆以倒置的小漏斗，在沸水浴中加热20min，然后置流水中冷却。
(3)吸附与洗脱：取3g活性氧化铝加入已水解的尿样中，以140g/L碳酸钠溶液慢慢滴入，并不断搅动，调节尿样的pH至8.2～8.4，立即将瓶置于振荡器上进行振荡吸附5min(275r/min)，静置数分钟后倾去上清液，然后将瓶内氧化铝混悬液倾入柱层析管中(管底填有玻璃丝或具有砂心，管径10mm)。滤干后，以约10ml 0.2mol/L醋酸钠溶液清洗一次，再以重蒸馏水洗二次，每次约5ml，滤干后加入0.2mol/L醋酸溶液进行洗脱，用带塞刻度筒收集洗脱液50ml。
(4)正丁醇处理：以20ml正丁醇加入上述洗脱液中，倒转振摇约2min，静置，待溶液澄清以后，仔细将上述正丁醇吸出弃掉，即得澄清洗脱液。
(5)荧光产物的生成：取25ml三角烧瓶3只，按表1操作。
(6)荧光测定：以硫酸奎宁溶液校准荧光计至固定读数。用405nm为激发波长，515nm为发射波长，读取各瓶荧光数值。
离心5～10min，进行荧光测定。
