试剂:
(1)荧光分光光度计(或荧光计)。
(2)层析柱长80mm,内径8mm。
(3)15%氢氧化钠溶液。
(4)1%高铁氰化钾溶液,保存于棕色瓶中。
(5)碱性高铁氰化钾溶液,取1%高铁氰化钾溶液1ml加15%氢氧化钠14ml,混匀(临用前配制)。
(6)2.5mol/L乙酸钠溶液。
(7)乙酸溶液(pH值4.5)。
(8)酸性氯化钾溶液,取浓盐酸8.5ml,用25%氯化钾溶液稀释成1000ml。
(9)正丁醇(沸点114~118℃),若有荧光产生时,应用玻璃接口蒸馏器重蒸馏,收集沸点114℃部分。
(10)维生素B1贮存标准液(100mg/L),将维生素B1预置于含无水氯化钙的干燥器中24h,然后称取10mg置于100ml量瓶中,用0.01mol/L盐酸溶解成100ml,置4℃可稳定数月。
(11)维生素B1应用标准液(1000μg/L),取上述维生素B1贮存标准液1.0ml,用乙酸溶液(pH值4.5)稀释成100ml,放4℃可稳定1周。
(12)硫酸奎宁贮存液(100mg/L),称取硫酸奎宁100mg,用0.05mol/L硫酸溶解并稀释成1000ml,盛于棕色瓶中,置4℃保存。
(13)硫酸奎宁应用液(300μg/L),吸取上述贮存液3.0ml,用0.05mol/L硫酸稀释成1000ml,放4℃可稳定2~3月。
(14)活性人造浮石,人造浮石是一种硅酸铝钠阳离子交换树脂,也称为滤沙或软水砂。将其通过80~100目筛孔,取其能在2min内沉淀到水溶液底部的产品。
活化方法:取人造浮石100g,在10倍于其容积的热的3%乙酸中搅拌两次,每次10min,再在5倍于其容积的热的25%氯化钾溶液中搅拌15min,然后再在热的3%乙酸中搅拌10min,再用热蒸馏水洗涤至氯离子呈阴性反应,同时检测铁离子,如含有大量铁离子时,则用酸性氯化钾溶液洗涤。全部搅拌过程可在大烧杯中进行,最后在布氏漏斗中抽干,并在80℃下干燥,保存在不漏气的广口玻璃瓶中备用。