原理:

用醋酸乙酯从酸化尿液中提取VMA，再用碳酸钾溶液提取有机相中VMA，并与重氮化对硝基苯胺反应，生成偶氮复合物，用氯仿抽提，然后用氢氧化钠溶液提取红色偶氮化合物进行比色测定。

操作方法:

(1)标本收集与保存：收集24h尿液，加入6mol/L HCl 10ml防腐，测量并记录尿液总量，混匀，取50ml送检。在留尿过程中应置4℃冰箱或冰冻保存。

(2)取具塞试管2支，标明“测定管”与“标准管”，分别加入尿液和标准应用液2ml，再加5mol/L HCl 0.1ml。

(3)向各管加入固体氯化钠约1.5g，振摇使之达到饱和，再加醋酸乙酯5ml，振摇5min，离心5min。

(4)另取具塞试管2支，标明“测定管”和“标准管”，分别依次加入相应的醋酸乙酯提取液(上层)4.0ml，再各加1mol/L碳酸钾溶液3.0ml，振摇5min，离心5min。

(5)再取具塞试管2支，标明“测定管”和“标准管”，分别依次加入相应的碳酸钾提取液(下层)2.0ml，各加重氮化对硝基苯胺溶液1.0ml，混匀，放置5min，再各加氯仿4.0ml，振摇1min，放置待分层。

(6)取第四批具塞试管2支，标明“测定管”和“标准管”，分别依次加入相应的氯仿提取液(下层)3.0ml，各加0.1mol/L NaOH溶液4.0ml，振摇1min，离心5min。此时氢氧化钠溶液层(上层)呈粉红色。

(7)吸出氢氧化钠溶液层加入比色杯中，分光光度计，波长500nm，用0.1mol/L NaOH溶液调零，分别读取吸光度(Au与As)。

临床意义:

基本同儿茶酚胺。在嗜铬细胞瘤发作时VMA明显增高,发作间隙期可有所降低,但多数病人此时仍高于健康人。尿VMA排泄率的检测也是用于神经母细胞瘤早期诊断较敏感的指标。VMA的临床敏感性与疾病所处阶段有关,还必须考虑患者年龄、检测方法及临界值。