原理:

目前关于革兰氏染色法原理有3种主要解释，即：等电点、化学和通透性。认为革兰氏阳性菌等电点比革兰氏阴性菌低，含有多量核糖核酸镁盐，细胞壁结构致密，肽聚糖壁厚，因而与结晶紫结合牢固，不易被酒精脱色而使其染成紫色，为革兰氏阳性菌，而被酒精脱色复染成红色或黄色者，为革兰氏阴性菌，从而将细菌分成两大类。

操作方法:

(1)涂片自干后经火焰固定，加结晶紫溶液染1min，水洗。

(2)加碘液媒染1min，水洗，去残留水份。

(3)加脱色液，不时摇动，至无紫色脱落为止，水洗。

(4)加复染液，染半分钟，水洗。

(5)干后镜检。

临床意义:

(1)肺炎双球菌：葡萄球菌肺炎(肺炎球菌性肺炎)。

(2)结核杆菌：呼吸道结核病。

(3)白色念珠菌：肺念珠菌病、真菌感染性口炎(鹅口疮)。