原理:

根据LDH各同工酶一级结构和等电点的不同，在一定的电泳条件下，使其在支持物上分离。以乳酸钠为底物，氧化型辅酶Ⅰ(NAD^＋)作氢受体，LDH催化乳酸脱氢，生成丙酮酸，并使NAD^＋还原为NADH。酚嗪二甲酯硫酸盐(PMS)将NADH的氢传递给氯化碘代硝基四唑(INT)，使其还原成紫红色甲

化合物。因此，有LDH活性的区带即显紫红色，其颜色深浅与酶活性成正比。由阳极至阴极其区带依次为LDH₁、LDH₂、LDH₃、LDH₄及LDH₅。因电渗作用，LDH₅位于加样槽之阴极端。

操作方法:

(1)制备凝胶玻片：取5g/L缓冲琼脂糖凝胶一管，置沸水浴中加热融化。吸取1.2ml融化的凝胶液，均匀地铺于拭净的7.5cm×2.5cm玻片上，待冷却凝固后，于凝胶板阴极端约1～1.5cm处挖槽，用滤纸吸去槽中水分。

(2)加样：用微量进样器加血清约40μl于槽内。

(3)电泳：电压75～100V，电流8～10mA/片，电泳30～40min，待血清白蛋白部分泳动3～4cm即可。

(4)显色：于电泳结束前5～10min，将底物显色液与沸水浴融化的8g/L缓冲琼脂糖凝胶按4∶5的比例混合，制成显色凝胶液，置热水(约50℃)中备用(注意避光)。

中止电泳后，取下凝胶玻片置铝盒内，立即用滴管吸取显色凝胶液约1.2ml，迅速滴于凝胶玻片上，使其自然铺展覆盖完全，待显色凝胶凝固后，加盖避光，置37℃水浴中，使铝盒浮于水面保温1h。

(5)固定和漂洗：取显色的凝胶玻片，浸入固定漂洗液中20～40min，至背景无黄色为止，再移至蒸馏水中漂洗多次，每次10～15min。

临床意义:

(1)胃癌：LDH升高2～3倍，LDH₅＞LDH₄＞LDH₃＞LDH₂＞LDH₁。

(2)萎缩性胃炎(中度或重度)伴肠上皮化生：LDH₄＞LDH₅＞LDH₃＞LDH₂＞LDH₁。