试剂:

(1)SPA菌体试剂的制备：

①菌种选择：已知90%以上的金黄色葡萄球菌含有SPA，每个菌体细胞壁上约有8万个SPA分子，每个SPA分子能结合两个或更多个IgG分子。100u的比容菌体能结合0.8～1.5mg IgG。但不同菌株所含SPA的量有显著差异。国际上通用的标准菌株是Cowanl株(NCTC-8530和ATCC-12598)，国内引进株编号为2611。对照用不含SPA的Wood46株，国内自行分离的No1800株为含SPA株，Z12株为不含SPA株。

②菌液制备：多采用酪蛋白培养基、牛心肌浸汤琼脂，或肉浸汤营养琼脂。

将选定菌种接种在琼脂平板上，37℃培养18h，选单个菌落移种于肉汤内，37℃16～18h再移种在琼脂平板上，37℃18～24h。用0.01mol/L pH7.2PBS或含10.0g/L葡萄糖、10.0g/L 2，3，5-三苯四氮唑的PBS洗下菌苔，以3500r/min离心30min。沉淀物用PBS洗2次，按比容用含0.5%甲醛PBS配成10%细菌悬液。放室温3h，再置56℃30min或80℃15min。取出用PBS洗3次，按比容配成10%悬液，加NaN₃至1.0g/L，4℃保存。

(2)抗体标记：取上述10%菌悬液1ml，用PBS洗3次后恢复至原体积，加入特异性高效价抗血清0.1ml，充分混匀，37℃30min，不时振摇，离心，用PBS洗2次，按比容用含1.0g/L，NaN₃的PBS配成10%菌悬液，此即为抗体标记的SPA应用液，4℃保存。

(3)各种对照用菌株、受检标本。

正常值:

阴性。

附注:

(1)试验需作多种对照如未标记的SPA菌液，正常兔血清标记的SPA菌液，抗体标记的SPA菌液，抗体标记不含SPA的菌液，以证明其特异性。

(2)用前仔细检查试剂本身有无自凝颗粒。

(3)本试验的特异性取决于标记用抗血清的特异性，凝集反应的强弱取决于抗血清的效价高低，故应选用特异性强和效价高的抗血清。

(4)SPA与各种属IgG的亲和力有所不同，与猪IgG亲和力最强，依次为狗、兔、人、猴、豚鼠、小鼠和牛。与绵羊和大鼠IgG的亲和力较弱，与牛犊、马、山羊和鸡IgG则不起反应。国内常用诊断血清系用兔、山羊或马免疫制备，因此必须选用兔抗血清。