原理:

人类B细胞表面带SmIg，每一个B细胞表面带有不同类的Ig，即IgM、IgD、IgG、IgA、或IgE。如用荧光法标记的抗人IgM、IgD、IgG、IgA及IgE抗体，分别同标记的荧光抗体染色，则荧光抗体与B细胞表面相应的SmIg结合，在荧光显微镜下观察，凡与荧光标记抗体结合的细胞则细胞膜呈现荧光，为SmIg阳性细胞，即B细胞，同时用普通光源照明，计数该视野的淋巴细胞总数，根据发荧光和不发荧光细胞的计数，可求得带各类SmIg细胞的百分数。把这些数相加为血液中B细胞的百分数。

操作方法:

(1)取肝素抗凝血2ml，加等量Hank液混匀，重层于分层液上，2000r/min，离心20min。取出淋巴细胞层，加Hank液，洗3次，1200r/min，离心10min，调整淋巴细胞浓度为1×10⁷/ml，取0.1ml分装两管。

(2)将淋巴细胞悬液再用Hank液洗1次，弃去上清，用滤纸吸去管内壁剩余液体，分别加兔抗人IgG及抗人IgM荧光抗体2滴(约0.08ml)，轻摇后，放37℃温箱30min。

(3)从温箱取出用Hank液洗两次，1000r/min离心10min，小心吸去全部上清，将管底沉淀的细胞加入50% PBS缓冲甘油1滴，混匀后取1滴加入载玻片上，覆以盖玻片，置荧光显微镜下观察。

临床意义:

B细胞数量的降低与体液免疫缺陷有关，B细胞数升高则与B细胞恶性增生等有关。