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血清补体C4裂解产物
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分类名称
一级分类:免疫学检查;二级分类:细胞免疫测定
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英文名称
serum complement C4 split product
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别名
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概述
概述:
C
4
是一种β球蛋白,由α、β和γ 3条多肽链组成,在肝脏、淋巴组织、骨髓、腹膜巨噬细胞、单核细胞等组织合成。C
4
参与补体的经典激活。
+
原理
原理:
抗原在含有一定量的单一抗体琼脂中进行电泳,在电场力的作用下,两者比例合适时形成沉淀峰类似火箭而得名。沉淀峰的高度与抗原浓度成正比,与抗体浓度成反比,因此可以作为抗原定量试验。
+
试剂
试剂:
(1)0.025mol/L pH8.6巴比妥缓冲液 称巴比妥钠10.3g,巴比妥1.84g,加入蒸馏水500ml,加热助溶,待冷,加蒸馏水至1000ml,即成0.05mol/L pH8.6巴比妥缓冲液。再取0.05mol/L巴比妥缓冲液1份,加等量的蒸馏水即成0.025mol/LpH8.6巴比妥缓冲液。
(2)10.0g/L琼脂糖凝胶 (用巴比妥缓冲液配制)。
(3)抗C
4
血清、C
4
参考血清及待检血清。
+
操作方法
操作方法:
(1)制备抗体琼脂糖板 取已融化的10.0g/L琼脂糖凝胶与适当浓度的抗C4血清混合,浇板(8cm×8.5cm),待冷却凝固后打孔。
(2)在距一边1cm处打孔8个,孔径为3mm,孔间距5mm,挑去孔内琼脂糖。
(3)各孔内分别加入1∶4稀释的待检血清和不同浓度的C4参考血清10μl。以三层滤纸为桥,置0.025mol/L pH8.6巴比妥缓冲液的电泳槽内进行电泳,将有孔的一端连接阴极,端电压3~4V/cm,电泳4~5h后,关闭电源,取下琼脂板测量。
+
正常值
正常值:
同单向免疫扩散法。
+
临床意义
临床意义:
C
4
含量升高见于风湿热的急性期、结节性动脉周围炎、皮肌炎、心肌梗塞、Reiter综合征和各种类型的关节炎等;降低常见于自身免疫性慢活肝、SLE、多发性硬化、类风湿性关节炎、肾病、亚急性硬化性全脑炎等。在SLE,C
4
的降低常早于其他补体成分,且较其他成分回升迟。狼疮性肾炎较非狼疮性肾炎C
4
值显著低下。
+
附注
附注:
(1)抗原、抗体比例要适宜。抗原过浓不能得到圆锥状尖峰,而抗体太浓使沉淀峰太低,影响试验的灵敏度。
(2)加样后马上电泳,且标本不要太多,以防止峰形变宽。
(3)C
4
不很稳定,在4℃贮存2周或-20℃ 60天均可使C
4
值增加36%左右。而在1周内还是相对稳定的。
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