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-分类名称
一级分类:免疫学检查;二级分类:血清补体测定
-英文名称
50%hemolytic unit of complement,CH50
-别名
-概述
概述:
利用补体的免疫溶细胞反应,当补体与靶细胞膜结合时,可引起靶细胞损伤、溶解。将绵羊红细胞(SRBC)用特异性抗体包被(致敏),此致敏SRBC与被测血清在体外混合时,通过使C1活化而激活补体传统途径,导致SRBC溶解。被测血清中的补体含量与溶血程度呈正相关,但并非直线关系,而是成一条S形曲线。在溶血率小于20%或大于80%时,补体量变化即使很大,溶血程度变化也不显著,故测定补体溶血活性时,均以50%溶血为终点,以CH50单位/ml表示。1个CH50单位是指在标准条件下裂解5×10⁷个致敏SRBC的补体量。C1～C9任何一个成分缺陷均可使CH50水平降低。但单个补体成分的蛋白含量下降到正常水平的50%～80%,CH50不一定表现变化。
+原理
原理:
将新鲜的受检血清作一系列稀释后，分别加入抗体致敏绵羊红细胞，经过一定时间的反应，根据溶血程度可判断受检血清中的总补体活性。
总补体测定现在用的是50%溶血活性测定，要比CH₁₀₀敏感，这是因为溶血程度在30%～70%的范围内补体的用量稍有变动即能影响溶血程度，因而CH₅₀单位比较准确。但是CH₅₀操作要求比100%溶血试验要高。
+试剂
试剂:
(1)pH7.4巴比妥缓冲液(含钙、镁离子)：巴比妥钠5.1g，氯化钠44.5mg，氯化钙42.5mg，氯化镁250mg，1mol/L盐酸(调pH)约30ml，加去离子水至1000ml，使用时取原液做1∶5稀释，当日用完。
(2)2%绵羊红细胞悬液：吸取经洗涤配制的2%羊红细胞悬液0.2ml，加入pH7.4巴比妥缓冲液5ml，混合后，倒入1cm比色杯，用721型分光光度计(波长542nm)比色。以巴比妥缓冲液作为空白，校正透光率到100%，读取测定管透光率，应为40%。如有差异，按比例给予调节。
(3)2U抗绵羊红细胞溶血素溶液：如溶血素的效价为1∶6000，则用巴比妥缓冲液稀释1∶3000即成。
(4)标准管制备：2%羊红细胞悬液2ml，加蒸馏水8ml，使其全溶血为100%全溶血管。取全溶血管上清2.5ml，加巴比妥缓冲液(pH7.4)2.5ml，即为50%溶血标准管。
+操作方法
操作方法:
平皿法
(1)将待检血清按1∶20稀释，吸取待检血清0.2ml于一试管中，加入巴比妥缓冲液3.8ml，混匀。
(2)取10支试管按(表1)加液混匀。
(3)将上述各管先与50%溶血标准管作初步目视比较，选择与标准管相接近的两管，用分光光度计在波长542nm读数，求出二者中更加接近标准光密度数的一管。根据此管中加入稀释血清的量按标准求出总补体值。
+正常值
正常值:
50～100KU/L
+临床意义
临床意义:
CH50活性增高常见于各种急性期反应,如急性炎症(风湿热急性期、结节性动脉炎、皮肌炎、伤寒、天花、麻疹、黄热病、肺炎、急性心肌梗死、甲状腺炎、阻塞性黄疸等)、组织损伤与肿瘤特别是肝癌等。
CH50活性减低可由先天性和后天性因素引起,先天性补体缺乏症比较少见,可由补体基因缺损或基因突变引起,主要导致补体成分或调节成分缺陷。后天因素主要由消耗增多、合成减少等因素引起,见于急性肾小球肾炎、SLE、大面积烧伤、冷球蛋白血症、严重感染、肝炎、肝硬化、组织损伤缺血等。
机体发生炎症时,补体值可以增高,但在多种自身免疫性疾患和变态反应性疾患,补体值往往下降。
+附注
附注:
(1)受检血清必须新鲜，如放置室温2h以上，会使补体活性下降。
(2)补体的溶血活性受多种因素的影响，如绵羊红细胞浓度及致敏抗体的量等。当每一致敏红细胞吸附的抗体分子低于100时，红细胞溶解程度随细胞浓度的增加而减少。当用高浓度抗体致敏时，溶血程度随细胞的增加而增加。红细胞浓度增加一倍，可使50%溶血补体量增加25%左右。钙、镁离子的存在可稳定溶血系统。但含量过多时，反而抑制溶血反应。因此在进行试验时，需对反应的各个环节作严格控制。
(3)本试验不能测定补体蛋白的绝对值，也不能测定备解素系统中的成分。

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