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-分类名称
一级分类:激素类测定;二级分类:其他激素测定
-英文名称
osteocalcin,OC
-别名
血清骨R-羟基谷氨酸蛋白
-概述
概述:
骨钙素是成骨细胞合成并分泌的,不受骨吸收因素的影响。主要生理功能是维持骨的正常矿化速率,抑制异常的羟基磷灰石结晶形成,抑制软骨矿化速率。完整的骨钙素可用胰蛋白酶水解成3个片段,即N末端、中段和C末端。骨钙素合成后约1/3进入血循环,在血中的半寿期约5min,主要由肾脏清除。故血清骨钙素水平基本上能够反映近期成骨细胞合成骨钙素和骨形成的情况。
+原理
原理:
放射免疫测定法：以7-19肽片段和蛋白结合制成免疫原，注射动物获得抗血清。血清中OC(非标记抗原Ag)和¹²⁵I-OC7-19(标记抗原^*Ag)共同竞争性的与抗体结合。随着检样中待测Ag浓度的增加，因^*Ag与Ab的结合被Ag的竞争结合所抑制，^*Ag-Ab复合物的数量逐渐减少。反应平衡后加入分离剂，用γ计数仪对沉淀的^*Ag-Ab复合物(B)进行放射性测定记数，再根据竞争抑制原理从标准曲线上查得血清中OC的浓度。
+试剂
试剂:
(1)试验缓冲液：取50mmol/L pH7.4 PB1000ml，加入NaCl 8.5g，BSA 1g，NaN₃0.5g。
(2)标准液：取OC7-19标准液(5μg/ml)，分装每瓶50、10、2.5、1.0、0.5ng。冷冻干燥，4℃冰箱保存；临用前用1ml试验缓冲液溶解，即得S₁_～5。
(3)¹²⁵I标记物：每瓶冻干品加12ml试验缓冲液溶解。
(4)抗血清工作液：用试验缓冲液稀释抗血清至100μl结合¹²⁵I标记物100μl的40%～50%。
(5)PR分离剂。
+操作方法
操作方法:
主要是免疫学方法(放射免疫法、ELISA法和化学发光免疫法)。
(1)取10mm×75mm塑料管，按表1加入样品试剂。
(2)加入PR分离剂后混匀，放37℃30min。离心15min，弃去上清液，在自动γ免疫计数器测放射性。
(3)以B/T计算NSB和S₀结合率，以B/B₀Logit为纵坐标，标准液浓度为横坐标，在专用坐标纸上得到一条相对应的直线。依样品管B/B₀Logit值直接查出待测血清中的浓度。也可以和计算机联接，在专用软件控制下，自动计算，拟合标准曲线，打印出样品OC浓度。
+正常值
正常值:
放射免疫法(RIA):4～10μg/L;ELISA法:1.5±0.7nmol/L;化学发光免疫法(CLIA):男3.11±1.4nmol/L,女2.10±0.77nmol/L。
+临床意义
临床意义:
(1)骨钙素升高常见于儿童生长期、肾功能不全、骨髓炎、骨折、甲状旁腺功能亢进、高转换率的骨质疏松患者、骨转移癌、低磷血症等。
(2)骨钙素降低常见于甲状旁腺功能减退、甲状腺功能减退、糖尿病、孕妇、使用糖皮质激素治疗等。
+附注
附注:
(1)骨钙素测定的影响因素:①骨钙素的生物节律性(早晨高,下午和傍晚达到最低点,其后逐渐上升,午夜和凌晨4:00间达到最高浓度);②标本类型(血浆与血清相比,血浆骨钙素浓度较低);③其他生物学因素(生理浓度的1,25(OH)₂D₃刺激骨钙素的合成;甲状旁腺激素、糖皮质激素泼尼松龙、Deflazacort及香豆素衍生物抑制骨钙素的合成;骨钙素的浓度随年龄的增长而增长;女性血清骨钙素浓度高于男性);④方法学因素(ELISA法和CLIA法具有操作简单、快速、用血量少、无放射性核素污染等优点,但其特异性差,定量不够准确;目前常用RIA法测定,灵敏度高,特异性强;溶血或脂血标本影响测定)。
(2)稳定性:如采血当天无法测量,血样需深度冰冻。

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