原理:

用¹²⁵I标记的双抗体放免法检测血浆中ACTH，实验过程中，¹²⁵I标记的ACTH与病人样本中的ACTH竞争抗体结合位点。经过一定时间温育，用PEG沉淀双抗法将结合的与游离的分离。将试管放在γ-计数器上计数，计数与病人样本中ACTH含量成反比。

操作方法:

使用前除沉淀剂外所有试剂均应在室温下平衡。

(1)标明T(总计数)、NSB(非特异性结合)、A(最大结合)及B到G，标明质控及血样，均作双管。

(2)向NSB及A管中加入100μl0标准品，向B到G管中加入相应试剂100μl，质控及血样均加100μl。

(3)向各试管加入100μl ACTH抗血清(除NSB及T管)混匀。

(4)室温温育60min。

(5)向各管加入100μl ACTH标记物。

(6)4℃温育至少16h。

(7)向各管中加入1ml沉淀剂、混匀。

(8)3000×g离心15min。

(9)用泡沫倾倒架，倾倒上清液，保留沉淀以计数。

(10)1min计数。

注：让试管倒置于吸水纸上10min，轻轻敲击试管，去掉残存液滴。

临床意义:

结合血浆皮质醇测定主要用于垂体相关的ACTH缺乏、继发性肾上腺功能低下、ACTH过量分泌,以及皮质醇增多症的鉴别诊断。ACTH依赖性皮质醇增多症(如下丘脑-垂体性库欣综合征)表现为血浆ACTH水平在参考区间上限或轻度升高,夜间ACTH多>15ng/L。ACTH不依赖性皮质醇增多症(如肾上腺皮质肿瘤致库欣综合征)则表现为夜间皮质醇增多(>150ng/L)伴ACTH缺如(<5ng/L)。而发生异位ACTH综合征或原发性肾上腺皮质功能减退时,血浆ACTH水平常常显著升高(>100ng/L)。此外,继发有肾上腺皮质功能减退时,皮质醇和ACTH水平都降低,而予以肾上腺糖皮质激素治疗也可使ACTH迅速降低。