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  • -分类名称
    一级分类:激素类测定;二级分类:肾上腺素测定
  • -英文名称
    17-ketosteroids,17-KS
  • -别名
    尿17-KS
  • -概述
    概述:
    尿17-酮类固醇(17-ketosteroids,17-KS)包括尿液中所有C-17上为酮基的类固醇物质,主要是雄酮、脱氢表雄酮等及其代谢产物。男性的尿17-KS大部分来自肾上腺皮质,少部分来自睾丸;而女性则几乎全部来自肾上腺皮质。因而尿17-KS的测定在男性反映了肾上腺皮质和睾丸的内分泌功能,而在女性则反映了肾上腺皮质的内分泌功能。由于这些类固醇物质的分泌具有昼夜节律性,因此通常检测24小时尿17-KS。
  • +原理
    原理:
    17-酮类固醇在强酸条件下加热水解,使之游离,用有机溶剂提取,在碱性环境中与间二硝基苯作用,生成红色化合物。
  • +试剂
    试剂:
    (1)浓盐酸(AR)。
    (2)5mol/L氢氧化钾去醛乙醇溶液。
    (3)1mol/L氢氧化钠溶液。
    (4)乙酸乙酯(AR)。
    (5)雄性酮标准液(100mg/L):精确称取雄性酮10mg,置干燥100ml容量瓶中,用经纯化的去醛乙醇溶解并稀释至刻度。分装于洁净的中号试管中,每管0.1ml(含10μg)37℃温箱中烘干,置暗处保存,每次测定时取出一管使用。
    (6)去醛乙醇液的制备:取无水乙醇1000ml,加盐酸间苯二胺4g,充分混匀后,静置暗处一周,每天振摇2次,到期进行蒸馏,并弃去开始蒸出与最后剩余部分各约50ml,收集所得的乙醇,置棕色瓶中保存。
    (7)750ml/L去醛乙醇液:取无水去醛乙醇75ml,加蒸馏水至1000ml。
    (8)20g/L间二硝基苯乙醇溶液:取无色的间二硝基苯0.2g。溶于去醛无水乙醇中,使总量为10ml。盛于棕色瓶内。冰箱保存备用。若间二硝基苯质量较差需做以下提纯处理:
    ①取间二硝基苯20g,于95%乙醇75ml中,加热至40℃左右使其溶解。
    ②加入2mol/L氢氧化钠溶液100ml。
    ③5min后,加入蒸馏水2500ml,混和。
    ④加滤纸在布氏漏斗中过滤,并用较多量的蒸馏水洗涤后吸干。
    ⑤依此法用无水乙醇120ml及180ml重结晶二次。置于干燥器内待用。
    (9)乙醚(AR)。
  • +操作方法
    操作方法:
    (1)在盛尿容器内加浓盐酸5ml作防腐剂。收集24h尿液,混匀,并量取总量。
    (2)取尿样5ml,放入20mm×150mm试管中,加浓盐酸15ml;在沸水浴中煮沸20min,取出,置冷水中冷却。
    (3)冷却尿样移入30ml小分液漏斗,加乙醚10ml,振摇2min,放置待分层后弃去下层尿液。
    (4)向小漏斗中加入1mol/L氢氧化钠5ml,轻摇1min,洗乙醚,放置澄清,弃去下层水相。
    (5)再用蒸馏水2.5ml,轻摇洗乙醚1min,放置澄清,弃去下层水相。
    (6)将乙醚移入15ml试管中,于40~45℃水浴中蒸干,此管即为测定管。
    (7)按表1进行操作,设测定管、标准管(内含雄性酮标准0.01mg)、空白管。
    将各管混匀,同时在1000r/min离心2min,取上层溶液移入10mm光径比色杯中。520nm波长,以空白调零,读取各管的吸光度。
  • +正常值
    正常值:
    成人 男28.5~47.2μmol/24h;女20.8~34.7μmol/24h。
  • +临床意义
    临床意义:
    (1)库兴氏综合征、睾丸瘤(尤其是间质细胞瘤)、性早熟、多囊卵巢、肢端肥大症等疾病尿17-KS明显增高。使用雄激素、皮质激素以及ACTH等药物也可使尿17-KS增高。
    (2)肾上腺皮质功能减退症、腺垂体功能减退症、睾丸功能减退症、肝硬化以及糖尿病、肺结核、高度营养不良等慢性消耗性疾病,尿17-KS都可出现降低。
    (3)先天性缺乏21-羟化酶或11-β-羟化酶的病人,尿17-OH可无异常,而尿17-KS异常增高。
  • +附注
    附注:
    (1)所用无水乙醇必须进行去醛处理,否则空白管读数太高,影响结果的准确性。
    (2)水分可影响间-二硝基苯与17-酮类固醇的缩合作用,故乙醚蒸发后,管内不应残留水分。
    (3)本法显色不够稳定,比色应在10min内完成,大批标本时宜分批显色。
    (4)如室温过低,比色液可显混浊,应在此前加饱和盐水0.1ml,使混浊消失后再进行比色。
    (5)如尿液不能及时测定,应置冰箱存放,以免17-酮类固醇破坏而使结果减低。
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