试剂:

全部试剂必须用去氨水制备。去氨水用蒸馏水经氢型阳离子交换树脂处理获得。

(1)66.7mmol/L KH₂PO₄溶液：取9.12g KH₂PO₄溶入去氨水中，定溶到1L，4℃保存。

(2)66.7mmol/L Na2HPO4溶液：取9.51g Na₂HPO₄溶解并加去氨水到1L，4℃保存。

(3)pH8.0(±0.05)，66.7mmol/L磷酸盐缓冲液(PB)：取5ml“1”液及95ml“2”液，混合，4℃保存，稳定3周。

(4)310mmol/L α-酮戊二酸：取0.45gα-酮戊二酸，溶于5ml去氨水中，用3mol/L氢氧化钠调pH至接近5.0时，改用0.1mol/L氢氧化钠调pH至6.8(±0.01)，切勿调得过碱，因高pH可破坏α-酮戊二酸，以去氨水稀释到10ml，4℃稳定10天；

(5)NADPH贮存液：称约10mgN-ADPH(－20℃、干燥器保存)溶于1mlPB中取出50μl，以PB稀释到5ml为工作液，以PB调零，1cm光径，在340nm波长读NADPH工作液的吸光度，计算NADPH贮存液中实际浓度：

6.22为NADPH的毫摩尔吸光系数，据上式计算结果确定制备GLDH工作液中加入NADPH贮存液的量，使达到149μmol/L。

(6)GLDH工作液：根据GLDH酶制品(－20℃干燥器中保存)的比活，称出酶活力为992U的相应量(如比活为50U/mg蛋白，则称20mg)，如GLDH在甘油中，可按U/ml吸出992U的相应体积，置50ml量瓶中，称入ADP(－20℃，干燥器中保存)15mg，吸入计算量的NADPH贮存液，以PB稀释到50ml，4℃保存可稳定7天；

(7)氨标准贮存液，100mmol/L：称取(NH₄)₂SO₄660.7mg，溶于去氨水定容到100ml，4℃保存；

(8)氨标准应用液：用去氨水分别稀释贮存液成25、50、100、及150μmol/L。

正常值:

18～72μmol/L。

附注:

血氨测定受多重因素影响 标本应采集于经处理的无氨密闭的玻璃器皿中,采取后应立即置冰水中,并尽快送检,必须在采血后15分钟内分离出血浆进行测定。临床结果分析应注意排除血氨测定的各种影响因素:①血氨浓度很低,且标本中氨又极不稳定,易被外界污染;②溶血标本使血氨测定结果假性升高(红细胞内氨浓度是血浆的23倍);③吸烟使血氨浓度增高(标本采集前一天午夜后禁止吸烟);④高水平GGT使谷氨酸盐分解产生氨;⑤运动及采血时压迫肌肉会使静脉血浆氨浓度升高。