试剂:
(1)磷酸盐缓冲液(0.02mol/L pH7.4):溶解磷酸二氢钾1.06g和磷酸氢二钠1.74g于950ml蒸馏水中,调节pH7.0,然后稀释到1000ml。
(2)半乳糖氧化酶:称取约1mg(相当30u)的半乳糖氧化酶干粉,置于乳钵中,加缓冲液研磨助溶,最后加缓冲液至50ml,过滤,此液可在冰箱保存数天。
(3)显色剂:溶解10mg过氧化氢酶干粉于500ml缓冲液中,加入10g/L邻联茴香胺甲醇溶液5ml,置冰箱保存。如溶液颜色变深,空白吸光度增高,则应弃去,重新配制。
(4)硫酸溶液30%(V/V):小心加浓硫酸300ml于700ml蒸馏水中。
(5)氢氧化钡溶液(0.15mol/L):溶解47g氢氧化钡(Ba(OH)2·8H2O)于新蒸馏水或煮沸的去离子水中,然后稀释至1000ml,如溶液出现混浊,则将瓶口塞紧,在室温中放置数日,取上清液应用。氢氧化钡能吸收空气中的二氧化碳生成碳酸钡沉淀。
(6)硫酸锌溶液(0.175mol/L):称取新结晶的硫酸锌(Zn SO4·7H2O)50g,以蒸馏水溶解并加至1000ml。
(7)半乳糖标准贮存液(10g/L):溶解D(+)半乳糖1g于蒸馏水中,稀释至100ml。
(8)半乳糖标准应用液:取贮存液1ml,2ml,分别以蒸馏水稀释到100ml,其浓度分别为0.55mmol/L,1.1mmol/L的半乳糖标准应用液。