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  • -分类名称
    一级分类:血液生化检查;二级分类:蛋白质测定
  • -英文名称
    total protein,TP
  • -别名
  • -概述
    概述:
    血清蛋白质是血清固体成分中含量最多的一类物质。血清总蛋白可分为清蛋白(白蛋白)和球蛋白两大类。其具有维持血管内正常胶体渗透压和酸碱度、运输多种代谢物、调节被运输物质的生理作用等多种功能,并与机体免疫功能有密切关系。血清总蛋白水平主要反映肝脏合成功能和肾脏病变造成蛋白质丢失的情况。总蛋白检查可间接了解机体的营养状况,协助诊断某些疾病。总蛋白检查抽取静脉血,用双缩脲法测定。
  • +原理
    原理:
    凡分子中含有两个氨基甲酰基(-CONH2)的化合物都能与碱性铜溶液作用,形成紫色复合物,这种反应称双缩脲反应。蛋白质分子中有许多肽键(-CONH-)都能起此反应,而且各种血浆蛋白显色程度基本相同,因此,在严格控制条件下,双缩脲反应可作为血浆蛋白总量测定的理想方法,从测定的吸光度值计算出蛋白含量。吸光度的大小与试剂的成分、pH、反应温度有关。
  • +试剂
    试剂:
    (1)6mol/L氢氧化钠:溶解240g优质纯氢氧化钠于新鲜制备的蒸馏水或刚煮沸冷却的去离子水中,稀释至1L,置聚乙烯瓶内盖紧保存。
    (2)双缩脲试剂:称取未风化没有丢失结晶水的硫酸铜(CuSO4·5H2O)3g,溶于500ml新鲜制备的蒸馏水或刚煮沸冷却的去离子水中,加酒石酸钾钠9g,碘化钾5g,待完全溶解后,加入6mol/L氢氧化钠100ml,并用蒸馏水稀释至1L。置聚乙烯瓶内盖紧保存。
    (3)双缩脲空白试剂:溶解酒石酸钾钠9g,碘化钾5g,于新鲜制备的蒸馏水中。加6mol/L氢氧化钠100ml,再加蒸馏水稀释至1L。
    (4)蛋白标准液:收集混合血清,用觊氏定氮法测定蛋白含量,亦可用定值参考血清或白蛋白标准血清。
  • +操作方法
    操作方法:
    操作方法见表1。
    混匀,置25℃30min(或37℃10min),用波长540nm。以空白管调零,读取各管的吸光度。
    高脂血症、高胆红素血症及溶血标本,应作“标本空白管”;即取血清0.1ml加双缩脲空白试剂5ml,以测定管吸光度减去标本空白管吸光度为测定管的标准吸光度。
  • +正常值
    正常值:
    与年龄有关(新生儿、婴幼儿与60岁以上的老年人稍低),与性别无关。成人血清、尿和脑脊液蛋白质检测参考区间,见表9-1。各实验室应建立自己的参考区间。
    Tab.9-1 Protein reference range of serum and urine and CSF
     TP (g/L)ALB (g/L )GLB (g/LA/G
    serum65~8540~5520~40(1.2~2.4):1
  • +临床意义
    临床意义:
    减低是指TP<60g/L(低蛋白血症),常见于:①蛋白合成减少(中毒、坏死等严重肝损害和先天性抗体缺乏症等);②蛋白摄入不足(营养缺乏和营养不良);③蛋白丢失过多(肾病综合征、肾小球肾炎、大面积烧伤、蛋白丢失性肠病等);④慢性消耗性疾病(恶性肿瘤、甲状腺功能亢进、重症结核等);⑤血液稀释。
    增高是指TP>80g/L(高蛋白血症),常见于:①蛋白(主要是免疫球蛋白)合成增多(多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症);②血液浓缩(脱水);③肝硬化(γ-球蛋白增高);④慢性感染性疾病(自身免疫性肝炎、脓毒症、梅毒、麻风、疟疾等)。
  • +附注
    附注:
    血清蛋白质检测的影响因素 除受测定方法的影响外,还受标本采集情况、机体状态、时间与季节等因素影响。分析检测结果时,必须考虑其有关影响因素。常见影响因素有:①激烈运动;②体位(卧位比直立位总蛋白浓度低,非卧位或站立时间大于15分钟,白蛋白浓度可增高);③标本溶血(可引起总蛋白测定值增加);④乳糜标本(结果偏高);⑤止血带压迫静脉时间超过3分钟,总蛋白浓度可升高;⑥昼夜变化;⑦季节(6月及12月可有低值与峰值之差);⑧标本类型(血浆比血清总蛋白测定值高)。因此,血清蛋白质检测时,应在静止、空腹、卧位状态下采血,应避免标本溶血和乳糜血,通常用血清(也可用肝素抗凝的血浆)。
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