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  • -分类名称
    一级分类:血液生化检查;二级分类:血液无机物测定
  • -英文名称
  • -别名
  • -概述
    概述:
    体内的磷除了以磷酸盐形式存在外,大部分磷是以有机大分子如磷脂、磷蛋白、核酸等有机磷形式存在,难以测定;细胞外液有少量以磷酸盐形式存在的无机磷(Pi)。血磷的测定通常是指测定血浆中的无机磷,80%~85%以HPO2-4的形式存在,其余为H2PO-4,而PO3-4仅含微量。
  • +原理
    原理:
    以三氯醋酸沉淀蛋白,在无蛋白滤液中加入钼酸铵试剂,与无机磷结合成磷钼酸盐复合物,再以硫酸亚铁为还原剂、还原成蓝色化合物,进行比色测定。与同样处理的标准进行比较求得血清中磷含量。反应式如下:
    (NH4)6Mo7O24+3H2SO4→7H2MoO4+3(NH4)2SO4
    12H2MoO4+H3PO4→12MoO3·H3PO4+12H2O
    12MoO3·H3PO4+还原剂→钼蓝(MB)。
  • +试剂
    试剂:
    (1)三氯醋酸-硫酸亚铁溶液:称取硫脲10g硫酸亚铁(FeSO4·7H2O)10.6g和三氯醋酸100g,以去离子水溶解并稀释至1L,置冰箱保存。
    (2)钼酸铵溶液:称取钼铵4.4g溶解于约40ml去离子水中,取浓硫酸9ml,滴加入约40ml去离子水中,将两液合并,以去离子水稀释至100ml。
    (3)无机磷标准贮存液(32.29mmol/L):称取无水磷酸二氢钾(KH2PO4,AR)4.39g,用去离子水溶解后移入1L容量瓶中,并稀释至刻度,再加入氯仿2ml防腐,置冰箱中保存。
    (4)无机磷标准应用液(1.29mmol/L):取无机磷标准贮存液4ml加入100ml容量瓶中,以去离子水稀释至刻度,加入1ml氯仿防腐,置冰箱中保存。
  • +操作方法
    操作方法:
    磷钼酸法和酶法。
    取血清0.2ml,加入三氯醋酸-硫酸亚铁液4.8ml,充分混匀,放置10min后,离心沉淀。无机磷标准也同样处理,然后按表1操作。
    混匀,放置15min,用波长640nm或红色滤光板,光径1.0cm比色,以空白管校正吸光度至0点,读取各管吸光度。
  • +正常值
    正常值:
    磷钼酸法和酶法:儿童1.15~1.78mmol/L,成人0.87~1.45mmol/L。
  • +临床意义
    临床意义:
    (1)高血磷:
    ①分布异常:重症溶血性疾病,横纹肌溶解症(含肾损害)、肿瘤细胞的溶解(化疗)给予diphosphonate(磷排泄被抑制)、甲状腺功能亢进(与磷排泄抑制及骨吸收亢进有关)。
    ②肾排泄减退:肾功能不全(急性、慢性)、甲状旁腺功能减退症、假性甲状旁腺功能减退症、生长激素过剩。
    ③急性磷中毒:静脉内给予(低磷血症的治疗时)过量含磷制剂。
    (2)低血磷:
    ①分布异常:呼吸性碱中毒(无酵解亢进)或糖皮质激素的治疗等。
    ②肠道吸收减少:饮食性、维生素D缺乏、吸收不良综合征、继发性甲状旁腺功能亢进(由肾丧失)、磷结合剂(口服Mg、Ca、Al)、肾上腺糖皮质激素、呕吐、胃液吸引(代谢性碱中毒)。
    ③由肾丢失:
    A.肾小管损害:Fanconi综合征(肾病-糖尿性侏儒症伴低血磷性佝偻病)、肾移植后(含继发性甲状旁腺功能亢进症、肾上腺糖皮质激素过剩)维生素D抵抗症、骨软化症、肿瘤性骨软化症(肠管、肾小管磷输送障碍、维生素D代谢异常),特发性高钙尿症、尿路阻塞解除后、急性肾小管坏死恢复期。
    B.代谢异常和药物:PTH分泌过剩、糖尿(渗透性利尿、磷再吸收与结合)、乙酰唑胺、代谢性碱中毒、代谢性酸中毒、呼吸性酸中毒、胰高血糖素过多、糖皮质类固醇过多、低钾血症、低镁血症等。
  • +附注
    附注:
    (1)磷的测定标本应选用血清,如用血浆,每ml标本内草酸盐含量不可多于2~3mg,过量的草酸盐可使磷测定时不易显色。
    (2)血标本不能溶血,并于采取血后尽快分离血清,以免血细胞内磷酸酯水解而使无机磷增加。
    (3)在血清中加入三氯醋酸-硫酸亚铁溶液时速度要慢,边加边混使蛋白沉淀物呈细颗粒,如蛋白沉淀呈片状,可将磷包裹在其中,使测定结果偏低。
    (4)加入钼酸盐后应立即充分混合。柠檬酸盐一旦同钼酸盐结合,就不再同磷结合。
    (5)尿磷测定与血磷相同。可取24h混合酸性尿(碱性尿磷酸盐会沉淀析出,故应加酸防腐),稀释100倍左右后测定。
    (6) ①样本及采血时间:血清优于血浆,血样本应在禁食一夜后的清晨采集;②溶血:溶血可引起假性增高,血标本必须在采血后2小时内将血清与血细胞分离,避免溶血;③血小板增多症时也可升高;④胆红素血症和高脂血症也干扰无机磷的测定;⑤检测方法和分析系统也可产生干扰作用;⑥生物学因素:含量高的单克隆免疫球蛋白症在采用磷钼酸法时,由于结合磷酸盐的原因可引起高磷酸血症,假性高磷酸血症在样本超滤后消失;⑦稳定性:血清和肝素化血浆标本在4℃稳定4天,15~25℃稳定1天。
    (7)血磷和血钙之间的关系 健康人血钙和血磷浓度的乘积是一个常数,在35~40之间。当疾病引起钙磷浓度变化时,若血钙升高,则血磷降低,当乘积过低时可发生佝偻病或软骨病;乘积超过40,钙磷可以骨盐的形式沉积在骨组织中。
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