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  • -分类名称
    一级分类:血液生化检查;二级分类:酶类测定
  • -英文名称
    prostatic acid phosphatase,PAP
  • -别名
  • -概述
    概述:
    前列腺酸性磷酸酶(prostatic acid phosphatase,PAP)是前列腺分泌的一种酶,属糖蛋白,分子量102 000,在酸性环境中活性最强,能水解有机磷酸酯。1936年Gutmann首次在前列腺癌骨转移的病人中发现有酸性磷酸酶活性升高。与PSA类似,PAP是诊断前列腺癌,监测前列腺癌疗效以及前列腺癌术后是否复发转移的辅助指标。
  • +原理
    原理:
    前列腺酸性磷酸酶放射免疫分析利用前列腺酸性磷酸酶具有多个抗原决定簇,选用三个针对不同决定簇的单克隆抗体(一个用125I标志作为示踪,另两个是配体标记物用于提高灵敏度、特异性及分离复合物目的),在配体包被的聚乙烯反应管内,标准品/待测样品的前列腺酸性磷酸酶与单克隆抗体形成复合物,然后加入抗配体抗体使前列腺酸性磷酸酶与单克隆抗体复合物与固相支持物上配体连结,达到分离游离单克隆抗体的目的,测定反应管的放射性计数,即可推算前列腺酸性磷酸酶含量。本法使用固相支持物及分离剂可在多种类似方法中使用[如前列腺特异抗原(PSA)测定]为通用试剂,便于大规模生产及方法学的稳定。
  • +试剂
    试剂:
    本方法采用IRMA-Count前列腺酸性磷酸酶试剂盒,组成如下:
    (1)125Ⅰ-PAP单克隆抗体:冻干品2瓶,内含125I标记的抗前列腺酸性磷酸酶单克隆抗体及配体标记的抗前列腺酸性磷酸酶单克隆抗体、防腐剂。使用前每瓶加入水11ml复原,放置10min后,充分混匀,呈黄色液体后使用,复原后2~8℃冰箱可保存30天(或至试剂瓶标明的失效期),每瓶放射性不超过275kBq。
    (2)配体包被的聚乙烯管:100支,用锡纸袋密封包装。在冰箱内密封干燥可保存1年。
    (3)抗配体抗体:1瓶(2.8ml)含防腐剂的蓝色液体。启封后在2~8℃冰箱内可保存30天。可直接用于实验。
    (4)前列腺酸性磷酸酶标准品:7瓶(A~G)冻干标准品,内含人血清,缓冲剂及庆大霉素。使用前用水复原。A瓶加入5ml、B~G瓶分别加入2.0ml,放置至少30min,并充分溶解混匀方可使用,其前列腺酸性磷酸酶含量分别为0、1、2.5、5、15、75、150μg/L。复原后在2~8℃可保存30天,但应避免反复冻融。
    (5)浓缓冲洗液:1瓶(40ml)内含缓冲剂,表面活性剂。使用前用水400ml稀释(最终体积440ml)后在2~8℃可保存6月。
  • +操作方法
    操作方法:
    试剂及待测样品须置室温下达平衡后方可加样。
    首先将包被的聚乙烯管依次编号,T管(1、2)用未经包被的聚乙烯管(12×75mm)代替,然后严格按操作程序(表1)操作:
  • +正常值
    正常值:
    ELISA:血清<4U/L。
  • +临床意义
    临床意义:
    1.前列腺癌 可见血清PAP浓度升高,特别是在前列腺癌第3、4期时。PAP测定诊断前列腺癌的特异性比PSA高,可达96%,但敏感性较PSA低,约为57%。血清PAP浓度与前列腺癌的分期有关,联合检测PAP和PSA可提高前列腺癌诊断的阳性率。
    2.良性疾病 前列腺肥大、前列腺炎和泌尿生殖系统疾病,也可见到PAP升高。
  • +附注
    附注:
    某些肾脏和前列腺检查可导致血清PAP升高,在判断测定结果时要予以考虑。
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