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  • -分类名称
    一级分类:血液生化检查;二级分类:酶类测定
  • -英文名称
    serum creatine kinase
  • -别名
  • -概述
    概述:
    肌酸激酶也称为肌酸磷酸激酶(creatine phosphatase kinase,CPK),主要分布于骨骼肌和心肌,其次为脑组织,存在于细胞的胞质和线粒体中,肝脏和红细胞中测不到CK活性。CK半衰期为10~12小时。CK同工酶有三种:CK-MB(即CK2)主要分布于心肌中,是电泳时中速移动部分;CK-MM(即CK3)主要分布于骨骼肌和心肌,是电泳时慢速移动部分;CK-BB(即CK1)为脑型同工酶,主要分布于脑、前列腺、肠和肺等组织,是电泳时移动速率最快的部分。正常人血清中以CK-MM为主,CK-MB少量(小于总CK活性5%),CK-BB极微量。因此,测定CK总活性,进一步分析CK同工酶的类型,对判断是否存在心肌梗死有一定意义。
  • +原理
    原理:
    (1)肌酸显色法:磷酸肌酸和二磷酸腺苷(ADP)在CK作用下生成ATP和肌酸,后者与双乙酰和α萘酚结合生成红色化合物,其颜色的深浅与酶活性成正比。
    (2)酶偶联法:CK催化ADP与磷酸肌酸之间的反应,产生ATP,偶联己糖激酶(HK)及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)的催化反应。HK催化葡萄糖被ATP磷酸化,形成葡萄糖-6-磷酸(G6P)。G6PD催化G6P被NADP氧化成6-磷酸葡萄糖酸内酯(6-PG)和NADPH,后者的生成速率与CK活性成正比。
  • +试剂
    试剂:
    (1)肌酸显色法:
    ①Tris-HCl缓冲液(pH7.4):称取Tris 2.42g,加蒸馏水100ml,0.2mol/L HCl 88.8ml,无水硫酸镁0.34g,调pH至7.4,室温可保存数月。
    ②12mmol/L磷酸肌酸溶液:称取磷酸肌酸钠盐43.6mg,加蒸馏水10ml,溶解后于-25℃或冰箱内冰盒中保存。
    ③4mmol/LADP溶液:称取ADP钠盐23.3mg,加蒸馏水10ml溶解,保存-25℃或冰盒中。
    ④混合底物溶液:临用前将试剂1、2及3等量混合,在9ml混合液中加盐酸半胱氨酸31.5mg,调pH7.4,置冰盒中可保存1周。若空白管吸光度太高,表明游离肌酸产生,应弃去重配。
    ⑤50g/L硫酸锌溶液:准确称取ZnSO4·7H2O 5g,加蒸馏水少许溶解,并稀释至100ml。
    ⑥60g/L氢氧化钡溶液:称取Ba(OH)2·8H2O 6g,溶于100ml热蒸馏水中,煮沸数分钟,冷却后加蒸馏水至100ml过滤。
    取5ml 50g/L ZnSO4溶液,加少许蒸馏水和酚酞指示剂2滴,用Ba(OH)2溶液滴至出现粉红色为止。根据滴定结果,用蒸馏水稀释Ba(OH)2溶液,使其恰与等体积的ZnSO4溶液中和。
    ⑦贮存碱溶液:称取NaOH 30g,无水碳酸钠64g,加入蒸馏水溶解,并稀释至500ml,置塑料瓶保存。
    ⑧α-萘酚溶液:称取α-萘酚400mg,加贮存碱溶液10ml。需新鲜配制,否则空白管吸光度偏高。
    ⑨双乙酰溶液:先配成10g/L水溶液,冰箱可保存数月。临用前用蒸馏水作20倍稀释。
    ⑩1.7mmol/L肌酸标准液:精确称取无水肌酸22.3mg,加蒸馏水至100ml,冰箱可保存数月。
    (2)酶偶联法:目前各实验室多购买商品试剂盒,国际临床化学联合会(IFCC)推荐的配方为:300U/L HK,2000U/L G6PD,2.0mmol/L ADP,5.0mmol/L AMP,10mmol/L 5腺苷二磷酸,2.0mmol/L NADP,20mmol/L NAC,30mmol/L磷酸肌酸,20mmol/L葡萄糖,10mmol/L醋酸镁,2.0mmol/L EDTA,0.1mmol/L咪唑缓冲液(pH 6.7)。
  • +操作方法
    操作方法:
    (1)肌酸显色法:按表1操作。
    混匀,在540nm波长,空白管调零比色,读取吸光度。
    (2)酶偶联法:各实验室可根据本室的自动分析仪型号及说明书编程,主要参数为:340nm波长,37℃,标本与试剂体积比为1∶50,延迟时间60s,反应时间60s,动力法。
  • +正常值
    正常值:
    CK总活性:男性80~200U/L,女性60~140U/L
  • +临床意义
    临床意义:
    (1)CK总活性升高见于:
    1)急性心肌梗死:AMI时CK在起病4~10小时内开始升高,12~36小时内达高峰,3~4天恢复正常(见表8-2,图8-2)。如果在AMI病程中CK再次升高,常表明有再次心肌梗死的发生。CK是AMI早期诊断的较敏感的指标。
    Tab.8-2 Cardiac marker of serum in AMI
    Start increases time (h)Peak time(h)Return normal time(h)Sensitivity (%)Specificity(%)
    cTnT3~610~2410~15d50~5974~96
    CK4~1012~3672~96--
    CK-MB3~612~2448~7217~6292~100
    FABP0.5~3.0-12~2478-
    Fig.8-2 The time course about rising of serum heart marker in AMI
    2)心肌炎和肌病:病毒性心肌炎CK明显升高;Duchenne肌萎缩时CK极度升高,但随病程延长而逐渐下降;多发性肌炎和各种原因引起的骨骼肌损伤、肌内注射氯丙嗪和抗生素以及剧烈运动等,CK均可升高。
    3)手术:心脏手术或非心脏手术均可导致CK增高,其增高程度与肌肉损伤程度、手术范围、手术时间有密切关系。转复心律、心导管术及冠状动脉成形术等均可引起CK增高。
    4)其他:剧烈运动、某些药物等,亦可引起CK增高。
  • +附注
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