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  • -分类名称
    一级分类:血液生化检查;二级分类:酶类测定
  • -英文名称
    serum adenosine deaminase
  • -别名
  • -概述
    概述:
    腺苷脱氨酶(ADA)系统命名为腺苷氨基水解酶,主要催化腺苷和脱氧腺苷,生成次黄嘌呤核苷和氨,是腺苷酸分解代谢的重要酶系之一。ADA广泛分布于人体各组织,以小肠黏膜和脾含量最高,肝、肾、骨、骨骼肌次之。在细胞内ADA主要定位于胞浆,白细胞中ADA活性高于红细胞。血清中ADA是由不同组织来源的同工酶组成,其底物相对特异性及活化能亦不同于组织ADA,血清中ADA的最适pH为5.5~6.5,组织ADA PH为6.5~8.5。ADA测定方法主要是比色法。
  • +原理
    原理:
    ADA催化腺嘌呤核苷水解,生成次黄漂呤核苷和氨,用波氏显色剂测定氨的生成量,间接反映ADA活力。
  • +试剂
    试剂:
    (1)腺苷缓冲液(pH6.8):在45ml去离子水中,加入1mol/L NaOH 4.8ml,煮沸除氨,加入KH2PO41.361g溶解,冷至70℃左右,加入腺苷133.6mg,加去离子水至50ml,加氯仿1ml防腐,置冰箱保存。
    (2)酚-亚硝基铁氰化钠溶液:取液态酚10ml,加去离子水至500ml,加亚硝基铁氰化钠40mg,置棕色瓶内冰箱保存。若空白管读数增高,应重新配制。
    (3)碱性次氨酸溶液:称NaOH 4g溶于0.01mol/L次氯酸溶液中,并加至500ml,置冰箱内长期保存。
    (4)氨标准贮存液(1mg/ml):取AR或GR硫酸铵于100~110℃烘干2h,置干燥器内冷却。准确称取0.472g,用去离子水溶解,加浓硫酸0.1ml,再加去离子水至100ml。
    (5)氨标准应用液(25μg/ml):取氨标准贮存液2.5ml于100ml容量瓶内,加去离子水至刻度。
  • +操作方法
    操作方法:
    按表1操作。
    混匀,37℃水浴30min,在640nm处,用蒸馏水调零,读取各管吸光度。
  • +正常值
    正常值:
    1~25U。
  • +临床意义
    临床意义:
    ADA活性测定主要用于肝胆疾病的诊断和鉴别诊断,也用于结核等疾病的辅助诊断。
    (1)肝胆疾病:急性病毒性肝炎、慢性活动性肝炎、肝硬化和肝癌等肝病ADA活性均不同程度升高,以肝硬化最明显。与ALT同时测定,对判断肝细胞的恢复程度价值更大。阻塞性黄疸时,ADA活性很少升高,故有助于黄疸的鉴别。
    (2)伤寒、传染性单核细胞增多症、风湿热、溶血性贫血、白血病及某些肿瘤患者血清ADA活性亦可升高。
    (3)结核性胸水中ADA活性明显高于癌性和非炎性积液,且胸水ADA活性及其比值>1。因此,血清ADA和胸水ADA活性及其比值测定,对鉴别积液的性质有重要意义。
    (4)结核性脑膜炎脑脊液ADA活性明显高于化脓性脑膜炎、病毒性脑膜炎、脑出血、脑梗死、脑外伤等。
  • +附注
    附注:
    (1)0.01mol/L次氯酸溶液可用安替福民溶液稀释而成,其活性氯含量可按下法标定:取安替福民液2ml,蒸馏水约20ml,碘化钾3g,溶解后加入冰醋酸5ml,以可溶性淀粉(1g/L)为指示剂,用0.1mol/L硫代硫酸钠滴定,根据其用量,计算出安替福民液中活性氯的浓度。
    (2)用氯胺T代替次氯酸钠,且前者有效氯浓度高,试剂保存时间长。配方为:NaOH 0.5g,Na2HPO4·12H2O 5.37g,氯胺T100mg,加水至100ml。置棕色瓶内可保存1年。
    (3)配试剂所用蒸馏水均应用去离子水或煮沸去氨以降低空白管吸光度。
    (4)上述单位乘以1.19可换算成国际单位浓度(U/L),其依据是:单位×1000/(60×14)。
    (5)红细胞内含有大量的ADA活力,故避免使用溶血标本。
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