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-分类名称
一级分类:血液生化检查;二级分类:酶类测定
-英文名称
serum alanine aminotransferase
-别名
血清丙氨酸氨基转移酶
-概述
概述:
丙氨酸氨基转移酶(ALT)是通常所称谷丙转氨酶(CPT)，存在于各组织细胞，以肝脏含量最多，其次是心肌细胞内，血清中酶活性很低。当这些组织病变，细胞坏死或通透性增强时，细胞内酶释放入血，使血清中ALT活性增高。血清ALT测定主要用于肝脏病的诊断。其测定方法有比色法和连续监测法。前者操作简单，不需特殊试剂和仪器，但结果不够准确，重复性不理想；后者快速，结果准确，是公认的好方法，但对试剂和仪器要求较高。
+原理
原理:
(1)比色法测定：ALT催化基质中的丙氨酸和α-酮戊二酸反应，生成谷氨酸和丙酮酸，后者与2，4-二硝基苯肼作用，生成苯腙，在碱性条件下显色。
(2)连续监测法：在ALT催化的反应中生成的丙酮酸，被LDH还原成乳酸，并使NADH氧化成NAD^＋，在340nm波长下吸光度降低，NADH的氧化速率与ALT活力成正比。
+试剂
试剂:
(1)比色法测定：
①0.1mol/L磷酸盐缓冲液(pH7.4)。
A液：称磷酸二氢钾13.6g，溶于水中，加水至1000ml，冰箱保存。
B液：称磷酸氢二钠(含两个结晶水)17.6g，溶于水中，并加水至1000ml，冰箱保存。
取A液80ml，B液420ml混合，置冰箱内保存即可。
②ALT基质液：精确称取DL-丙氨酸1.79g和α-酮戊二酸29.2mg，溶于50ml磷酸盐缓冲液中，用1mol/L NaOH溶液(约0.5ml)校正pH7.4，再加磷酸盐缓冲液至100ml，可稳定2周。加麝香草酚90mg，可延长使用时间。
③1mol/L 2，4-二硝基苯肼(DNPH)溶液：称取DNPH 19.8mg，溶于1000ml 1mol/L HCl中，置室温保存。
④0.4mol/L NaOH溶液：溶解16.0g NaOH于水中，并加至1000ml，置带塞塑料瓶内，置室温保存。
⑤2mmol/L丙酮酸标准液：可购买或自配。准确称取22.0mg丙酮酸钠(AR)，置于100ml容量瓶中，加0.05mol/L硫酸至刻度。
(2)连续监测法：
①基质液的成分和浓度(IFCC)：100mmol/L Tris缓冲液(pH7.5)，15mmol/L α-酮戊二酸，500mmol/L L-丙氨酸，0.18mmol/L NADH，0.1mmol/L磷酸吡哆醛，1200U/L乳酸脱氢酶。
②市售试剂盒：按说明书用蒸馏水或稀释液溶解，用后置冰箱保存，一般可稳定4天。
+操作方法
操作方法:
(1)比色法测定：其基质液37℃预温，按表1操作。
混匀，置37%水浴20min，各管加0.4mol/L NaOH溶液5ml，混匀，置室温5min后，在505nm处用对照管调零点，读取各管吸光度，查标准曲线即得ALT活力单位。
(2)连续监测法：各实验室可根据本室的分析仪型号及操作说明书而定。主要参数：340nm波长，37℃，样本与试剂体积比为1∶10。
+正常值
正常值:
(1)比色法测定：5～25卡门单位。
(2)连续监测法：成人5～40U/L(基质中含P-5’-P时为8～50U/L)。
+临床意义
临床意义:
ALT测定对肝炎的诊断、疗效观察和预后估计均具有重要价值。
(1)急性肝炎显著升高，尤其对无黄疸、无症状肝炎的早期诊断更有帮助，其阳性率高，阳性出现时间较其他试验早，其活性的高低随肝病的进展和恢复而升降，据此可观察病情及预后。ALT持续处于高水平或反复波动，表示病变仍在进行或转为慢性肝炎。若黄疸加重，ATL反而降低，即所谓的“胆酶分离”现象，常是肝坏死的先兆。
(2)慢性肝炎、肝硬化、肝癌等ALT活性轻度升高。
(3)胆道疾病、心肌和骨骼肌损伤也可引起ALT升高。
+附注
附注:
比色法测定：
(1)严重黄疸、溶血、脂血标本可使测定结果偏高，以自身血清作对照可消除之。
(2)超过正常的标本应复查，＞150U时应用生理盐水稀释后重新测定，其结果乘以稀释倍数。
(3)定期校正仪器、加样器和吸管，更换仪器或基质液时应重新绘制标准曲线。

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