原理:

本试验是在预包被抗-HBe的微孔板上进行的二阶段反应。在第一阶段，将酶标抗体加入试验微孔中，并孵育一定时间。如标本中存在表面抗原便会与包被在微孔表面的抗体结合，同时与酶标抗体结合形成包被抗-HBe-HBeAg-酶标抗体固化复合物。假如标本中没有HBeAg则无法形成这种复合物，未结合的血清或血浆蛋白将在洗涤过程中被洗去。在第二阶段，加入TMP，如微孔中存在固化的复合物，则OPD被氧化形成有色的终产物，加入硫酸后这种反应将终止。

操作方法:

按试剂盒使用说明书进行操作。

(1)两步法操作：

①加样品：检测HBeAg时，在包被反应板(条)各孔内加入样品100μl，每次试验有阴、阳性对照，37℃保温2h，洗板4次。检测抗HBe时，各孔加入中和试剂50μl及样品50μl，每次试验有阴、阳性对照，37℃保温2h，洗板4次。

②加抗HBe-HRP：各孔加入抗HBe酶结合物100μl，37℃保温2h，洗板4次。

③显色：各孔加入底物液100μl，37℃保温15min后加终止液1mol/L硫酸50μl。

④结果判读：A.目测法：检测HBeAg时，无色为阴性，淡黄色至橘色为阳性。检测HBe时，橘红色为阴性，无色及淡黄色为阳性。B.比色法：在酶标仪上，以试剂空白校零点，测各孔在492nm光密度值。

检测HBeAg时：当

大于或等于2.1为阳性，否则为阴性。

检测抗HBe时：当

大于或等于2.1为阳性，否则为阴性。

(2)一步法操作：

①加样品：同时加中和试剂及抗HBe-HRP。A.检测HBeAg：在包被反应板(条)各孔内加入样品50μl及抗HBe-HRP 100μl，混匀后37℃保温1h，洗板4次。B.检测抗HBe：各孔内加入样品50μl，中和试剂及抗HBe-HRP各50μl，混匀后37℃保温1h，洗板4次。

②显色和判读结果：同两步法。

临床意义:

HBeAg阳性表明在肝细胞内复制活跃，血清具有高度传染性。急性乙肝时HBeAg呈短暂阳性，一般不超过10周，如持续阳性提示转为慢性。