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  • -分类名称
    一级分类:血清学检查;二级分类:病毒的血清学检查
  • -英文名称
    hepatitis B surface antibody
  • -别名
    抗-HBs;HBsAb
  • -概述
    概述:
    HBV感染和免疫注射HBV疫苗都可产生乙型肝炎表面抗体(HBsAb)。HBsAb有IgM和IgG两型,前者发生在感染早期,后者发生稍后,它是一种保护性抗体,有良好的中和作用,并能在血清中长期存在。
  • +原理
    原理:
    采用纯化HBsAg包被反应板,加入待测标本,同时加入HBsAg-HRP,当标本存在抗-HBS时,该抗-HBS与包被HBsAg结合并与酶结合物形成HBsAg-抗HBS-HBsAg-HRP复合物,加入TMB底物产生显色反应,反之则无显色反应。
  • +试剂
    试剂:
    0.05mol/L碳酸盐缓冲液,pH9.6(Na2CO30.16g、NaHCO30.29g,NaN30.02g,加蒸馏水至1000ml,4℃保存);0.05mol/L PBS-Tween20缓冲液,pH7.4(NaCl 8g,KH2PO40.2g,NaH2PO4·12H2O 2.9g,KCl 0.2g,Tween20 0.5ml,加蒸馏水至1000ml);0.02mol/L Tris-HCl-Tween 20缓冲液,pH7.4(Tris 2.42g,1mol/L HCl 3ml,Tween 0.5ml,加蒸馏水至1000ml)。抗HBs·IgG(包被用),辣根过氧化酶标记抗HBs(抗HBs·HRP)和底物(邻苯二胺)随药盒配备或自购。
  • +操作方法
    操作方法:
    (1)取用碳酸盐缓冲液作适当稀释的抗HBs·IgG(用抗HBs血清自提或随药盒配备)包被聚苯乙烯反应板,每孔加0.1ml(最后1孔不加,作为空白)。加盖,放4℃ 24h。次日用Tris-HCl-Tween20缓冲液洗涤3次,最后将板倒置于吸水纸上,使各孔液体流尽。
    (2)各孔加入待测血清0.1ml(观察滴度可作不同稀释)。每板同时做阳性血清和阴性血清对照。加盖,置37℃ 2h后移去各孔液体,如上法洗涤3次。
    (3)各孔加入底物溶液(0.1mol/L Na2HPO45.14ml,0.05mol/L枸橼酸4.86ml,邻苯二胺4mg,3%H2O20.05ml,避光,临用时配制)0.1ml,置室温暗处15~30min。待阳性对照孔充分显色后,各孔加入2mol/L H2SO40.05ml终止反应。
  • +正常值
    正常值:
    阴性。
  • +临床意义
    临床意义:
    抗HBs是HBV感染后主要的保护性抗体,一般出现于HBsAg消失后,在乙肝恢复期缓慢上升,可持续多年。抗HBs阳性表示急性乙肝或隐性感染已经恢复,并具有对HBV的免疫力,注射乙肝疫苗后,血清中出现抗HBs是免疫成功的标志。
  • +附注
    附注:
    (1)试剂使用前应摇匀,并弃去l~2滴后垂直滴加,注意均匀用力。
    (2)从冷藏环境中取出的试剂盒应室温平衡30min再进行测试,余者应及时封存,置冰箱内储藏备用。
    (3)冷藏的待查标本需置室温平衡30min,再可检测。
    (4)待检标本不可用NaN3防腐。
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