试剂:
(1)聚苯乙烯微孔板。
(2)酶标检测仪。
(3)呼吸道合胞病毒抗原:用呼吸道合胞病毒Long株感染Vero细胞,当病变呈++++时收获,经100g/L去氧胆酸钠处理,低速离心,收集上清即为ELISA抗原,用同批正常细胞同法制备正常细胞抗原。亦可待细胞病变达+++时,倾去维持液,用灭菌去离子水洗2次,加入为原培养液半量的去离子水,冻化3次,10000r/min离心,30min,取上清56℃灭活30min,正常细胞抗原亦用同法制备。
(4)患者双份血清:急性期血清于发病3天内采取,恢复期血清于病后3周采取分离血清。
(5)辣根过氧化酶标记羊抗人IgG。
(6)包被液:即pH9.6碳酸缓冲液,其配制方法为称无水碳酸钠(Na2CO3)159mg,碳酸氢钠(NaH-CO3)293mg,溶解至总量为100ml的蒸馏水中。
(7)洗涤液:即0.5% Tween-20生理盐水(NS-T),其配法为100ml生理盐水中加入0.5ml Tween20。
(8)稀释液:即2%牛血清NS-T,其配制方法为100ml洗涤液中加入2ml小牛血清。用于稀释待测样品及酶结合物。
(9)底物液:先配基质液,其配方是称磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)18.4g,柠檬酸(C6H8O7H2O)5.1g,加蒸馏水至1000ml,配后分装保存于4℃。再配底物液,其配法为10ml基质液中加4mg邻苯二胺,加5ml双氧水(H2O2)。底物液应现用现配。
(10)终止液:即2mol/L,硫酸(H2SO4)。