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-分类名称
一级分类:血清学检查;二级分类:病毒的血清学检查
-英文名称
-别名
-概述
概述:
戊型肝炎病毒(hepatitis E Virus，HEV)为经肠道传播引起戊型肝炎的病原体，呈球形，表面无囊膜，二十面体立体对称，表面有突起结构，内部核酸为单股RNA，属嵌杯状病毒科的嗜肝RNA病毒属。HEV有表面抗原HEVAg，可刺激机体产生抗体。
+原理
原理:
夹心法。包被板上的戊型肝炎抗原(HEVAg)与待测血清中的抗-HEV结合后，再与酶标记抗-人IgG(HRP-抗-人IgG)结合，形成 HEVAg·抗-HEV·HRP-抗-人IgG复合物，经与底物作用后呈现橘黄色反应为阳性。待测血清中无抗-HEV时则不呈色为阴性。
+试剂
试剂:
(1)包被板：用3块板分别包被HEVAg A、B和阴性对照蛋白。
(2)稀释液：Tris缓冲液(含热处理的正常羊血清、牛血清白蛋白和稳定剂)。
(3)酶结合物：HRP-抗-人IgG，用时以稀释液作1∶1000稀释。
(4)底物液：1片OPD加入5ml底物缓冲液中溶解混匀。为无色液体。
(5)洗涤液：0.01mol/L PBST缓冲液(一块板用300ml)。
(6)终止液：1mol/L H₂SO₄溶液。
+操作方法
操作方法:
(1)每个待检血清同时做3块板。
(2)加样品。
①3块板上的每孔加200μl稀释液。
②各板上的A₁B₁孔加10μl稀释液为空白，C₁D₁孔加10μl阴性对照血清，E₁F₁孔加10μl阳性对照血清，G孔以后加10μl待测血清(1∶21)混匀，封板，置37℃温箱中30min。
(3)洗涤板：用PBST洗涤液洗板6次，拍干。
(4)加酶结合物：每孔加HRP-抗-人IgG稀释液100μl，封板，置37℃温箱中30min。
(5)洗涤板：同3。
(6)加底物显色：每孔加新鲜配制的底物液100μl，封板，置室温暗处15min，每孔加终止液50μl。
(7)比色：用酶联检测仪波长为492nm测每孔A值。
+正常值
正常值:
A值＜0.3，阴性。
+临床意义
临床意义:
戊型肝炎(hepatitis E，HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的病毒性肝炎。抗-HEV是HEV感染人体后产生的特异性抗体，在急性期时增高，恢复期时下降。在急性肝炎患者中的检出率约为30%左右(北京地区)，与甲型肝炎近似。抗-HEV可做为HEV感染的早期特异性诊断指标。
+附注
附注:
(1)严格遵守操作规程。
(2)质量控制空白孔A值＜0.2，阴性对照A值＞0和＜0.2(减去空白)，阳性对照A值＞0.8(减去空白)。
(3)未用完的包被板放入含有干燥剂的原袋中密闭保存。
(4)加样品和试剂后勿在水浴中保温。
(5)底物片和底物液勿放在强光下，用非金属的小镊子取OPD片。
(6)其它同ELISA法。

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