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  • -分类名称
    一级分类:血清学检查;二级分类:病毒的血清学检查
  • -英文名称
  • -别名
  • -概述
    概述:
    寄生于人体的疟原虫有4种,即间日疟、恶性疟、三日虐和卵形疟。疟原虫抗体检测,间接免疫荧光法是目前应用最广泛的方法。疟原虫抗原检测需用红细胞溶解物来测定。其中,放射免疫法主要用于恶性疟的诊断。酶联免疫吸附测定不能区分间日疟和恶性疟,只能在单纯间日疟或恶性疟流行区使用。通过疟原虫抗体、抗原测定,提高了对虐疾的检测率。人体感染疟原虫后,发生原虫血症后1周就可检出免疫抗体,且在短期内达高峰。抗体效价的高低与个体的免疫应答、有无重复感染、治疗是否彻底等有关。抗体检测的主要价值在于疟疾的流行病学调查(包括流行水平、监测传播强度、确定范围、考核治疗效果等)。临床上对多次寒冷发作而未查明病因者,疟原虫抗体的检测将有助于诊断。
  • +原理
    原理:
    间接免疫荧光法:受检血清中的抗疟原虫抗体与血片上的疟原虫抗原相结合,继加荧光标记的抗人IgG抗体,使与血片上的人IgG作用,而在抗原部位显现荧光。
  • +试剂
    试剂:
    (1)抗原血片:采用食蟹猴疟原虫薄血膜片和恶性疟原虫薄血膜片。专业研究机构可供应。保存于4℃或低温冰箱中备用。
    (2)荧光标记抗人IgG,国内有商品供应。
  • +操作方法
    操作方法:
    (1)按常规方法采集血清或用口径1.2cm的玻(铁)管的管口在滤纸上压出圆形印迹。从受检者耳或手指取血并加满圆圈,其血量约为20μl(约相当血清10μl),编号后阴干,放入有干燥剂的密封塑料袋内,运送至实验室,4℃可保存半年,-20℃可保存2年。检测时将干血滴剪下后放入反应板凹孔中,加0.01mol/L磷酸盐缓冲液0.2ml(pH值7.2),4℃浸泡过夜即成相当于1∶20的血清稀释液。
    (2)从冰箱中取出抗原血片,立即用电风扇吹干,用特种蜡笔将每张抗原片划分成若干小格,每小格试1个标本或1个滴度,每格加血清1滴。每批试验均需设阴、阳性参考血清和PBS空白对照。加血清后立即移入湿盒,37℃温育30min后,用0.01mol/L PBS(pH值7.2)缓慢冲洗后放入有PBS的缸内浸泡5~10min。
    (3)逐格滴加用0.01mol/L PBS(pH值7.2)稀释成1∶10的抗人IgG荧光抗体,置湿盒内37℃ 30min,同法洗涤后,每小格中加甘油和PBS等量混合液或蒸馏水,覆以盖片,于荧光显微镜下镜检反应结果。
    (4)结果判读:以裂殖体和大滋养体胞浆的荧光强度和结构清晰程度区分,无荧光为(-),荧光微弱、形态结构不清为(±),荧光较弱、形态结构尚清楚为(+),另外根据荧光明亮度和结构清晰度的增加依次分为(++)~(++++)。
    一般以1∶20血清稀释度时荧光强度(+)以上判为阳性。
  • +正常值
    正常值:
    阴性。
  • +临床意义
    临床意义:
    阳性:见于各型疟疾。对恶性疟疾患者抗体新途径价为1∶80或更高,可认为是带虫者或近期感染疟疾的标志。
  • +附注
    附注:
    由于抗体产生于疟原虫血症之后,因而临床查疟原虫抗体对初发病人无早期诊断价值。
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