原理:

病毒感染机体后，机体会产生针对该病毒的中和抗体。当含中和抗体的血清与病毒结合后，就使其失去感染细胞的能力，接种细胞后，细胞就不会被感染产生病变。据此可以检测出体内是否含有针对该病毒的中和抗体及其效价。

操作方法:

(1)抗原片(靶细胞)制备，将脊髓灰质炎病人标本20%大便悬液，分别编号，各号分别感染Vero或Hep-2单层细胞各1瓶，待CPE出现＋＋～＋＋＋时，用刮取或酶胰消化法，收集细胞悬液于10ml离心管中，1000r/min，离心5min，PBS洗3次，最后悬浮至0.3～0.4ml PBS中，使细胞浓度为1～2×10⁶个细胞/ml，取带孔载玻片，滴片，使每孔内含细胞均为5×10⁴～1×10⁵，每份标本(包括参考毒株)各涂3孔。对照细胞3孔。

(2)涂好的抗原片，置空气中自然干燥，冷丙酮固定10min，可立刻使用或－20～70℃保存备用。

(3)用2/万伊文思蓝，按工作浓度分别稀释Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ型FITC-McAb。每份标本分别滴加Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型FITC-McAb各1孔，置湿盒中，37℃孵育30min后用PBS洗3次，50%PBS甘油封片，荧光显微镜读结果。

(4)判定标准：应考虑荧光细胞的数目分布及亮度。荧光细胞多而闪亮＋＋＋＋；荧光细胞多而亮＋＋＋，荧光细胞亮度一般＋＋；荧光细胞灰暗或朦胧＋。

(5)凡那个型别荧光染色细胞出现＋＋或以上者即判为该型病毒阳性，若有两个型或两个以上均出现荧光阳性染色细胞即为混合感染，对照成立。

临床意义:

中和抗体为IgG型，出现较晚。脊髓灰质炎病毒感染后，在发病后2～3周达高峰，1～2年内逐渐下降，持续时间很长，一直保持一定水平。恢复期与急性期抗体效价有4倍或4倍以上增长，可诊断。