原理:

试验分两个阶段进行，先使试验系统中被检血清、已知抗体和定量补体作用一段时间，再加入指示系统(绵羊红细胞与溶血素)若被检血清中无已知抗原相对应的抗体，就不形成抗原抗体复合物，补体仍全部游离，则被指示系统的抗原-抗体复合物固定，使红细胞发生完全溶血，试验结果为阴性。反之，若被检血清中有已知抗原相对应的抗体，形成大量抗原抗体复合物，当补体全部被固定时，无游离补体存在，则红细胞完全不溶，试验结果为阳性。

操作方法:

(1)溶血素滴定：按表1成分、次序、剂量加入各管进行滴定。

溶血素单位：即能完全溶解红细胞的溶血素最高稀释度，按上表假定结果，1∶2400稀释度(0.1ml)的溶血素为1个单位。如实验时应用2个单位，即1∶1200稀释度(0.1ml)的溶血素溶液。

(2)补体滴定：将补体稀释成1∶30。按表2成分、次序、剂量加入各管中作滴定，整个试验过程中补体应放在冰水盒中，防止活性下降。

补体单位：即能发生完全溶血现象的最小补体量。按上表假定结果，1∶30补体0.12ml内含1个单位，则0.24ml含有2个单位。为使0.2ml中含有2个单位，可按下法计算稀释：

补体作1∶25稀释后，每0.2ml中含有补体2个单位。

(3)抗原滴定：

①将64支试管排方阵，即8行与8排。

②先作二倍稀释已灭活(56℃ 30min)的免疫血清。于第一排1～8各管中加1∶2稀释血清0.1ml，将1∶4稀释血清加至第二排1～8管中，如此二倍递增稀释血清加到第七排。第八排不加血清，以0.1ml盐水代替，作为抗原对照。

③同上法稀释抗原。第一行1～8各管中加1∶2稀释抗原0.1ml，第二行中1～8各管中加1∶4稀释抗原0.1ml，如此，二倍稀释抗原加到第七行，第八行不加抗原，以0.1ml盐水代替，作为血清对照。

④在各对照管中补充盐水0.1ml。

⑤然后，再于每管中加入2u补体0.2ml，放置4℃冰箱16～18h，次日置37℃水浴箱中30min，各管中加入1.25%绵羊红细胞及溶血素(2u)各0.1ml，再放置37℃水浴箱中30min。

⑥观察结果：如“＋＋＋＋”表示补体完全被检验系统所固定，呈现全不溶血：“－”表示补体完全未被检验系统固定，呈现完全溶血；在二者之间不同程度者则以“＋＋＋”、“＋＋”、“＋”、“±”表示之。

抗原单位：即能与最高稀释倍数的血清呈“＋＋＋＋”反应的抗原最高稀释倍数即为1个抗原单位，如表所示，1∶8。试验时用2个单位，即1∶4。

临床意义:

阳性：流行性腮腺炎，并发脑膜炎、睾丸炎、胰腺炎、卵巢炎等。