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麻疹病毒抗体
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分类名称
一级分类:血清学检查;二级分类:病毒的血清学检查
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英文名称
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别名
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概述
概述:
人是麻疹病毒的自然宿主。由于目前使用麻疹疫苗尚达不到终身免疫,以及不典型的病例增加,因此检测麻疹病毒特异性抗体可早期快速诊断麻疹。
+
原理
原理:
ELISA间接法:将麻疹抗原包被于ELISA板上。加待测血清,麻疹抗体结合抗原于板上。加入酶标记抗人IgG,加底物显色者为抗体阳性。
+
试剂
试剂:
(1)聚苯乙烯ELISA板。
(2)微量加样器(10,50,100μl)。
(3)碳酸盐缓冲液(pH9.5)。
(4)洗液:0.5ml/L Tween 20生理盐水(NS-T)。
(5)标本稀释液:2%牛血清NS-T。
(6)底物液:邻苯二胺-H
2
O
2
。
(7)2mol/L H
2
SO
4
。
(8)麻疹抗原,对照抗原,辣根过氧化物酶抗人IgG结合物,由试剂盒提供。
+
操作方法
操作方法:
(1)按试剂盒说明工作浓度以碳酸盐缓冲液分别稀释麻疹抗原与对照抗原,分别平行包被ELISA板,每孔100μl。4℃过夜。
(2)待测血清以稀释液稀释至1∶100,加入麻疹抗原孔与对照抗原孔各100μl,37℃ 1~2h。
(3)用标本稀释液稀释抗人IgG酶结合物,每孔100μl。37℃ 1~2h。
(4)加底物100μl/孔。37℃ 10~15min后用2mol/L H
2
SO
4
50μl/孔终止反应。
(5)492nm波长测A值(吸光值)。
+
正常值
正常值:
阴性。
+
临床意义
临床意义:
抗MV-IgM阳性:确诊麻疹病毒感染。
抗MV-IgG阳性:表示机体对麻疹有免疫力。
+
附注
附注:
(1)1~4步骤间均以。NS-T洗板3次。
(2)每次实验设阳、阴性血清对照。
(3)若欲测抗体滴度可选择1∶100,1∶400,1∶1600,1∶6400。A比值≥2.1的血清最高稀释度倒数为抗体效价。
(4)血清1∶100稀释测定为阴性者即为麻疹抗体阴性。
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