原理:

采用双抗体夹心法，用纯化抗甲胎蛋白抗体吸附于固相载体表面，加待检血清和酶际记抗甲胎蛋白抗体，最后加底物出现显色反应，其显色强弱与样品中甲胎蛋白含量成正比。

操作方法:

按说明书操作，甲胎蛋白参考标准品可稀释成3、6、12、25、50、100μg/L系列浓度。受检血清为1∶10稀释。

结果判断如用目测，可将待检血清孔的显色深浅与标准孔的显色结果比较，再乘以稀释倍数，可作为半定量报告。如用酶标仪测A₄₉₂值，以A₄₉₂值为纵坐标、甲胎蛋白浓度为横坐标绘制的标准曲线上查得样品甲胎蛋白浓度，再乘以稀释倍数即为定量结果。

临床意义:

1.AFP

(1)原发性肝细胞癌患者:血清中AFP明显升高,阳性率为67.8%～74.4%。约有50%的患者AFP>300μg/L,但也有18%的肝癌患者AFP不升高。未经治疗患者早期AFP升高缓慢,随着肿瘤的生长速度加快,AFP指数上升。在原发性肝细胞癌的晚期,AFP的上升与肿瘤的生长不一定相关,有时反而明显不对称地增高,这是由于肝脏的代谢紊乱(肝衰竭)引起的。AFP适用于对患原发性肝细胞癌或胚胎细胞恶性肿瘤的高风险人群进行监测,不适合于肿瘤的筛查。

(2)病毒性肝炎、肝硬化患者:AFP有不同程度的升高,但其水平常<300μg/L。AFP升高的原因,主要是由于受损伤的肝细胞再生而幼稚化,此时肝细胞便具有重新产生AFP的能力,随着受损肝细胞的修复,AFP逐渐恢复正常。AFP阳性的肝脏疾病患者发展为原发性肝细胞癌的比例较高,且5年的预后较差。肝硬化、急性病毒性肝炎和慢性活动性肝炎患者AFP水平可升高,但只是短暂升高,肝硬化伴AFP浓度异常的患者发展为原发性肝细胞癌的风险更高。

(3)生殖腺胚胎性肿瘤患者:血清中AFP可见升高,如睾丸癌、畸胎瘤等。

(4)妇女妊娠:3个月后,血清AFP开始升高,7～8个月时达到高峰,一般在400μg/L以下,分娩后3周恢复正常。孕妇血清中AFP异常升高,应考虑胎儿有神经管缺损畸形的可能性。

2.AFP异质体的意义 AFP是一种糖蛋白,不同来源的AFP由于糖链结构上的差异,对刀豆素(Con A)或小扁豆凝集素(LCA)的结合能力也不相同,此种糖链结构不同的AFP称为AFP异质体,并以此分为结合型与非结合型两种。LCA结合型AFP在电泳时速度较慢,非结合型电泳速度较快,从而可将其分开。AFP异质体分析对于有AFP升高的原发性肝癌与良性肝病(急慢性肝炎、肝硬化等)有鉴别诊断意义。通常以LCA结合型AFP≥25%提示为原发性肝癌,低于25%者多属良性肝病。