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过氧化物酶染色
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分类名称
一级分类:血细胞化学染色;二级分类:
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英文名称
peroxidase stain
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别名
过氧化酶染色
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概述
概述:
骨髓或血细胞中,有的含过氧化物酶。该酶可分解H
2
O
2
,产生新生态氧。新生态氧可将无色的联苯胺氧化为联苯胺蓝,进而变成棕黑色化合物,沉淀于胞质内。
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原理
原理:
粒细胞和单核细胞胞浆内含过氧化物酶,能借助受体(联苯胺)脱氢催化过氧化氢而释放新生氧。受体被氧化成联苯胺蓝,再与亚硝基铁氰化钠结合成稳定的蓝色颗粒而沉淀于胞浆内。
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试剂
试剂:
(1)联苯胺溶液:联苯胺0.3g,加36%亚硝基铁氰化钠溶液1ml,再取95%乙醇加到100ml,水浴加热助溶。贮于棕色瓶中,可保存数月。工作时应小心溶液污染皮肤。
(2)稀双氧水:临用前将30%双氧水用蒸馏水1∶80稀释。
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操作方法
操作方法:
(1)新鲜干燥血片或骨髓片,加联苯胺液5~8滴,使布满整张涂片,固定1~2min。
(2)加等量稀双氧水,用吸球吹吸,使两液混匀,作用4~8min。
(3)涂片用流水冲洗,待干后再用瑞氏染液复染,复染时间约30min。
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正常值
正常值:
正常人群粒细胞呈阳性(胞质内含蓝绿色或棕褐色颗粒);单核细胞呈阴性或弱阳性;幼红细胞、浆细胞、巨核细胞、淋巴细胞呈阴性。
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临床意义
临床意义:
对白血病诊断有意义,急性粒细胞白血病除早期原粒细胞呈阴性反应或弱阳性反应外,其余各阶段均呈阳性反应。急性多颗粒早幼粒细胞白血病早幼粒细胞呈强阳性反应。急性单核细胞白血病原始细胞呈阴性或弱阳性反应。慢性粒细胞呈强阳性反应。淋巴细胞白血病呈阴性反应。组织细胞白血病呈阴性反应。
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附注
附注:
(1)标本新鲜,放置过久细胞内的过氧化物酶易于消失。
(2)过氧化氢浓度对染色结果影响甚大,浓度过高抑制酶的作用,涂片中看不见阳性颗粒,红细胞呈棕色或绿色;浓度过低失去应起的作用。验证方法:将其滴加在未染色血膜上,产生微小气泡为准。
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